南京农业大学学报 /oa 封面 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20170600 2017年11月10 00:00 2017年6期 0 0 805405 目录 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706000 2017年11月10 00:00 2017年6期 0 0 768505 亚磷酸盐在农业上的应用及机制研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706001 亚磷酸盐被证明对农作物具有增产抗病的功效,是一种新型环保的化学制剂。本文针对国内外亚磷酸盐作为杀菌剂和功能性肥料在农业上的应用研究及作用机制进行综述。目前亚磷酸盐在国外已经广泛应用到植物病虫害防治及植物营养领域,而我国对其相关研究及应用则较为滞后。亚磷酸盐用作杀菌剂在抑制茄属、芸薹属及其他叶菜类等卵菌纲病菌方面均有很好的效果,同时在增加草莓、马铃薯等作物开花、产量、果实大小及可溶性物质含量等方面具有很好的肥效。作用机制研究证实,亚磷酸态磷可在作物木质部和韧皮部进行双渠道运输,加快营养吸收和利用;在抗病方面,研究者普遍认为亚磷酸态磷能诱导作物产生抗御毒素及病程相关蛋白(PR蛋白),可能依赖水杨酸(SA)开启防御机制,使作物对病原菌产生持续免疫力,但至今尚未有明确定论。本研究综述结果可为我国开展亚磷酸盐在农业上的推广应用提供参考。 2017年11月10 00:00 2017年6期 949 956 991719 李宝玉<sup>1,2</sup>, 高明杰<sup>3</sup>, 高春雨<sup>3</sup>, 余婧婧<sup>3</sup> 籼稻品种‘IR13427-45-2-1-2-2-2’抗白背飞虱QTL定位 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706002 <b>[目的]</b> 白背飞虱及其传播的南方黑条矮缩病危害日益加剧,严重危及水稻生产。本研究旨在发掘水稻抗白背飞虱基因,为抗白背飞虱品种培育提供有用的基因资源。<b>[方法]</b> 利用高抗白背飞虱水稻品种‘IR13427-45-2-1-2-2-2’(简称‘IR13427’)与感虫品种‘宁粳3号’构建1个包含92个家系的F<sub>2:3</sub>群体,进行白背飞虱抗性鉴定,选取极端个体进行连锁分析,构建有连锁迹象的染色体连锁图谱,运用MAPMAKER/EXP Version 3.0软件进行QTL (quantitative trait locus)检测。<b>[结果]</b> 利用10个极感和12个极抗个体,在第5、6和9染色体上发现连锁迹象,构建了这3条染色体的连锁图谱,进行QTL检测,结果在第5和第6染色体检测到2个QTL,分别命名为<i>qWBPH5</i>和<i>qWBPH6</i>,贡献率分别为11.90%和18.30%,LOD值为2.42和3.28。<b>[结论]</b> 籼稻品种‘IR13427’对白背飞虱的抗性由数量性状位点控制,本研究检测到2个抗白背飞虱QTL,为水稻抗白背飞虱基因的克隆及品种培育奠定基础。 2017年11月10 00:00 2017年6期 957 962 1403818 沈子杰<sup>1</sup>, 范德佳<sup>1</sup>, 何俊<sup>1</sup>, 黄捷<sup>1</sup>, 江玲<sup>1</sup>, 程遐年<sup>1</sup>, 刘裕强<sup>1</sup>, 万建民<sup>1,2</sup> H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>浸种对油菜种子低温萌发的缓解效应 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706003 <b>[目的]</b> 低温会延长晚直播油菜萌发时间,缩短冬前生长期,降低油菜越冬期抗寒性,因此采取有效措施促进油菜低温萌发具有重要意义。<b>[方法]</b> 以甘蓝型油菜品种‘中双11号’(敏感型)和‘南农油4号’(耐寒型)为材料,采用种子萌发试验,设置(22±1)℃正常对照(CK)、(10±1)℃低温处理(LT)和(10±1)℃过氧化氢(H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>)浸种3个处理,研究了H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>浸种处理对油菜种子萌发过程中低温胁迫的缓解效应。<b>[结果]</b> 低温胁迫显著降低2个品种油菜种子发芽势、发芽率及发芽指数,延长平均发芽时间(<i>P</i>&lt;0.05)。H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>浸种处理可提高种子内的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性以及抗坏血酸(AsA)和谷胱甘肽(GSH)含量,有效抑制活性氧(ROS)产生,降低细胞膜质过氧化程度,并且促进抗寒基因<i>Cu/Zn-SOD</i>和<i>BnICE1</i>表达量的增加。0.05% H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>浸种处理后,2个品种种子的发芽势、发芽率以及发芽指数显著增加,平均发芽时间显著减少,表现出较高的萌发能力。<b>[结论]</b> H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>浸种处理可促进油菜种子抗寒基因的表达,提高油菜种子低温萌发过程中的抗氧化性能,增强油菜种子耐低温萌发能力。 2017年11月10 00:00 2017年6期 963 970 1378864 张曼, 戴蓉, 张顺凯, 江海东 白菜类作物开花时间相关基因<i>BraA. FLM. a</i>的CAPS标记开发与利用 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706004 <b>[目的]</b> 本文旨在研究白菜类作物开花时间候选基因<i>BraA. FLM. a</i>的酶切扩增多态性序列(CAPS)标记开发与利用。<b>[方法]</b> PCR扩增2个亲本的<i>BraA. FLM. a</i>基因外显子2到内含子2区域的特异序列,开发CAPS标记BraA. FLM. a-<i>Nla</i> Ⅲ,用CAPS标记对F<sub>2</sub>分离群体的基因型进行检测,并进行Pearson相关性分析研究基因型与开花时间表现型的关系。<b>[结果]</b> 通过调查亲本早开花油用型品种‘Yellow sarson’材料YS-143和晚开花芜菁品种‘Vegetable turnip’材料VT-044的开花时间和F<sub>2</sub>群体的开花时间,发现两亲本的开花时间存在显著性差异。通过PCR扩增克隆了两亲本的<i>BraA. FLM. a</i>基因的特异序列,并在突变位点T-A处开发出CAPS标记BraA. FLM. a-<i>Nla</i> Ⅲ。在136份F<sub>2</sub>分离群体上进行此CAPS标记的验证后,发现T基因型开花时间晚于A基因型的开花时间,并且差异显著(<i>P</i>&lt;0.05)。<b>[结论]</b> <i>BraA. FLM. a</i>基因的CAPS标记BraA. FLM. a-<i>Nla</i> Ⅲ与开花时间表型显著相关,该标记可以用作开花时间的分子选择辅助育种。 2017年11月10 00:00 2017年6期 971 976 2017492 周道云, 肖栋, 申浩冉, 高立伟, 侯喜林 果梅CCoAOMT蛋白Western-blot体系建立与优化 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706005 <b>[目的]</b> 本文旨在建立一套适合于果梅(<i>Prunus mume</i>) Western-blot的蛋白质提取和技术体系。<b>[方法]</b> 以果梅品种‘小绿萼’花芽为试验材料,以咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT)为目标蛋白,分别采用Tris-HCl法和SDS上样缓冲液直接提取法,比较2种提取方法的优劣,并通过设置不同的蛋白上样量(20、30、40、50及60 μg)、转膜时间(40、60及90 min)、一抗稀释比例(1:500、1:1 000、1:2 000及1:5 000)以及一抗孵育时间(室温1 h、室温2 h及4℃过夜)等组合,研究适合果梅花芽CCoAOMT蛋白Western-blot的最佳体系。<b>[结果]</b> 成功建立了快速、灵敏、特异的Western-blot体系,确定了果梅花芽CCoAOMT蛋白的Western-blot试验条件。SDS上样缓冲液直接提取法提取蛋白快速、高效,最佳条件为以蛋白上样量30 μg、转膜1 h、一抗稀释比例1:1 000以及一抗孵育2 h。<b>[结论]</b> 本试验建立了简单、快速和重复性好的SDS上样缓冲液直接提取法以及优化的上样量、转膜时间和抗体浓度等Western-blot体系,为梅等木本植物开展Western-blot研究提供依据。 2017年11月10 00:00 2017年6期 977 982 1175294 张勇, 侍婷, 吴欣欣, 高志红 滁菊’病毒脱除及脱毒苗品质分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706006 <b>[目的]</b> 本文旨在比较3种脱毒方法对‘滁菊’病毒脱除的效果,并对‘滁菊’脱毒苗和非脱毒苗在遗传稳定性、产量和品质等方面的表现进行分析和比较。<b>[方法]</b> 采用电镜观察和巢式PCR两种方法检测‘滁菊’8种(类)病毒;比较茎尖分生组织培养、热处理结合茎尖分生组织培养及病毒唑结合茎尖分生组织培养3种脱毒方法的脱毒率,筛选出确定‘滁菊’病毒脱除的最适方法。采用SRAP分子标记技术检测脱毒苗和非脱毒苗的遗传稳定性,并以总黄酮、绿原酸以及鲜花产量等为检测指标,比较脱毒苗与非脱毒苗的产量品质。<b>[结果]</b> 病毒检测结果表明:侵染‘滁菊’的主要(类)病毒为菊花B病毒(CVB)和菊花矮化类病毒(CSVd)。热处理结合茎尖分生组织培养和病毒唑结合茎尖分生组织培养脱毒效果较单独采用茎尖分生组织培养脱毒效果好且差异显著,当2种(类)病毒CVB和CSVd都脱除时,脱毒率能达到35.21%、36.62%。3种脱毒方式均能保持‘滁菊’的遗传稳定性。采用脱毒‘滁菊’种苗生产,其在单株产量和品质上都显著优于非脱毒苗‘滁菊’,花直径、单株花数、单株产量分别比非脱毒苗高4.5%、21.2%、24.0%。<b>[结论]</b> 茎尖分生组织培养结合热处理或病毒唑处理脱除‘滁菊’病毒效果明显,采用脱毒‘滁菊’种苗生产能有效提高产量和品质。 2017年11月10 00:00 2017年6期 983 992 2922158 吴丹<sup>1</sup>, 宋爱萍<sup>1</sup>, 史亚东<sup>2</sup>, 陈发棣<sup>1</sup>, 房伟民<sup>1</sup>, 陈素梅<sup>1</sup>, 管志勇<sup>1</sup> 氟对茶树花粉管抑制及其与NO关系的研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706007 <b>[目的]</b> 茶树是超富集氟的植物,本文探究氟对茶树花粉萌发率和花粉管生长的作用及其与广谱信号分子一氧化氮(NO)的关系。<b>[方法]</b> 以无性系茶树品种‘龙井长叶’的花粉为材料,通过不同质量浓度的氟、NO供体(DEA NONOate)和NO清除剂(cPTIO)处理,研究了不同浓度氟和NO对茶树花粉离体萌发和花粉管生长的作用,并检测了氟处理后茶树花粉管中NO相对含量和NO合酶(NOS)的相对活性。<b>[结果]</b> 氟显著抑制花粉的萌发率和花粉管的伸长,加入25 μmol·L<sup>-1</sup>外源NO供体和氟共处理,增强了氟的抑制效应,而加入200 μmol·L<sup>-1</sup> NO清除剂和氟共处理能够有效缓解氟的抑制效应。此外,氟处理促进茶树花粉管NO释放并伴随着NOS活性的提高。<b>[结论]</b> 氟抑制茶树花粉萌发和花粉管伸长与其诱导NO释放有关,且氟诱导的NO释放部分依赖于NOS的活性。 2017年11月10 00:00 2017年6期 993 997 1132548 李东芹, 叶小丽, 朱姣姣, 潘俊廷, 常品品, 崔传磊, 朱旭君, 房婉萍, 王玉花 中国园林空间分析之驻点研究法——以网师园为例 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706008 <b>[目的]</b> 本文旨在以量化的方法探究中国古典园林空间布局的规律性。<b>[方法]</b> 以苏州网师园为研究对象,提出"驻点"概念,运用基于视频分析技术的驻点研究法,计算各驻点游人分布数量,探究空间路径驻点游人分布规律。<b>[结果]</b> 网师园共有驻点72个,分6级,其中高等级驻点(特级、一级)8个,占11.1%,分布于水院空间周边的3个,其他空间的5个;二、三级驻点39个,占54.2%;四、五级驻点共25个,占34.7%。驻点分布最广的是山林空间27个,但高等级驻点仅1个;建筑连廊空间中驻点分布数量达21个,高等级驻点4个;建筑室内与独立连廊空间驻点分布数量共34个,高等级驻点3个;平台空间仅有3个较低等级驻点。路径可达性佳、面积大、具备休憩功能、空间转换处、可赏之景丰富多样5个条件是形成高等级驻点的基础,其中路径可达性佳和可赏之景丰富多样是成为高等级驻点必要的条件。<b>[结论]</b> 本文证实了用科学量化的驻点研究法探寻传统园林空间布局规律之可行性,并得出网师园驻点等级划分结果与驻点游人分布规律。 2017年11月10 00:00 2017年6期 998 1006 4672651 丁绍刚<sup>1</sup>, 陆攀<sup>1</sup>, 刘璎瑛<sup>2</sup>, 程顺<sup>2</sup> 水稻白叶枯病菌毒力基因<i>tal17.5</i>病理学功能的研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706009 <b>[目的]</b> 类转录激活蛋白(transcription activator-like effectors,TALE)是稻黄单胞菌水稻致病变种(<i>Xanthomonas oryzae</i> pv. <i>oryzae,Xoo</i>)中的一类重要致病因子。挖掘新的毒力<i>tal</i>基因,对揭示水稻白叶枯病菌与寄主植物的互作关系具有重要意义。<b>[方法]</b> 从水稻白叶枯病菌JXOV菌株中克隆了1个中间串联重复区含17.5个重复单元的<i>tal基因,命名为tal17.5。将tal17.5转入Xoo</i>菌株PXO99<sup>A</sup>中,在寄主水稻上研究了其致病力作用,将<i>tal17.5</i>转入ME2中研究了其诱导相关<i>OsSWEET</i>基因的表达情况;在非寄主烟草上研究了其对烟草防卫反应功能的影响。<b>[结果]</b> <i>tal17.5</i>导入PXO99<sup>A</sup>之后增强了PXO99<sup>A</sup>在所测试的22个水稻品种中的11个品种上的致病力,并减弱了PXO99<sup>A</sup>在烟草上的防卫反应,能够一定程度地诱导<i>OsSWEET11</i>和其他5个<i>OsSWEET</i>基因的表达。<b>[结论]</b> TAL17.5通过抑制植物的防卫反应发挥一定的毒力作用。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1007 1013 1787808 孙荣华, 李融梅, 何翔, 宋从凤 灰飞虱水通道蛋白基因克隆及其与杀虫剂代谢的关系 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706010 <b>[目的]</b> 水通道蛋白是细胞膜内嵌蛋白超家族的主要成员,具有传输水分子以及小分子化合物进出细胞膜的功能,本研究目的是分析重要农业害虫灰飞虱体内水通道蛋白功能及其与杀虫剂代谢之间的关系。<b>[方法]</b> 根据转录组数据,采用PCR和RACE技术对灰飞虱体内的水通道蛋白基因进行了克隆,并利用进化树对获得的基因进行亲缘关系的分析验证,利用实时荧光定量PCR技术分析这些基因在灰飞虱抗、感品系间的表达量差异,利用体外表达技术分析其转运活性。<b>[结果]</b> 从灰飞虱体内克隆获得了6个灰飞虱水通道蛋白基因全长序列,分别命名为<i>LsAQP1、LsAQP2、LsAQP3、LsAQP4、LsAQP5</i>和<i>LsAQP6</i>,其中<i>LsAQP6</i>在灰飞虱的不同抗性品系里均高表达。体外功能表达试验显示:LsAQP6对水具有很强的转运能力,对灭多威也具有显著的转运能力,但对甘油和杀虫双的转运能力不显著。<b>[结论]</b> LsAQP6在灰飞虱体内对水和某些小分子农药具有转运作用。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1014 1022 3895136 周晨, 韩召军 黄瓜根际芽孢杆菌亲缘辨识特性研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706011 <b>[目的]</b> 依据群集运动表型和16S rRNA基因序列信息研究黄瓜根际芽孢杆菌亲缘辨识能力,进而形成直接合作的多细胞行为,找到解淀粉芽孢杆菌SQR9的近亲菌株。<b>[方法]</b> 采用高温处理和稀释涂布的方法从黄瓜根际筛选芽孢杆菌,得到菌株后分析其16S rRNA基因测序结果,结合swarming平板对峙表型对芽孢杆菌类群进行亚家族分类。最后通过24孔细胞培养板静置培养、salkowski比色法分析吲哚乙酸(IAA)产量和植酸酶活性测定的方法评价SQR9近亲菌株的促生潜力。<b>[结果]</b> 初筛共选出118株芽孢杆菌,复筛后确定为21株。菌株swarming对峙后表现融合、半融合和对峙3种表型。在融合的27组菌株里,25组有100%相同的16S rRNA基因,而其余2组的基因相似度较低。产生边界的组合中只有10%(142对中只有15对)的16S rRNA基因相似度大于99%;半融合的基因相似性为99.5%~100%。菌株SQR9的亲近菌株P2、W-4和N-2在生物膜形成、IAA分泌和植酸酶活性等方面都接近SQR9。<b>[结论]</b> 初步证明swarming表型与16S rRNA有一定的相关性,菌株SQR9近亲菌株P2、W-4和N-2都是潜在的根际促生菌。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1023 1030 3614125 徐志辉<sup>1</sup>, 黄蓉<sup>1</sup>, 张钰婷<sup>1</sup>, 冯元韬<sup>1</sup>, 张馨玉<sup>1</sup>, 仇美华<sup>2</sup> 枯草芽孢杆菌NTGB-178高产芽孢发酵工艺优化 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706012 <b>[目的]</b> 优化枯草芽孢杆菌NTGB-178发酵工艺,为提高发酵液中的生物量与芽孢产量,降低该菌产品制剂生产成本提供技术支撑。<b>[方法]</b> 采用响应面法(RSM)对NTGB-178发酵工艺进行优化。在单因素试验基础上,利用Plackett-Burman设计试验,筛选出影响NTGB-178芽孢产量的主要影响因子。利用最陡爬坡试验,确定逼近存在最大响应值的中心点。最后利用Design-Expert软件设计Box-Behnken试验,对其结果进行多元二次回归拟合,建立响应面方程,绘制响应面图,并对影响发酵产孢的主要因素及其交互作用进行响应面分析和评价,确定最优的液体发酵培养条件。<b>[结果]</b> 麸皮、NaCl、初始pH为影响NTGB-178芽孢产量的主要因素,方程预测最优水平为:麸皮10.35 g·L<sup>-1</sup>,NaCl 4.41 g·L<sup>-1</sup>,初始pH6.07,其他条件分别为:玉米粉12.5 g·L<sup>-1</sup>,豆粕25.0 g·L<sup>-1</sup>,CaCO<sub>3</sub>1.0 g·L<sup>-1</sup>,MgSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O 2.0 g·L<sup>-1</sup>,接种量4%,装液量65 mL/250 mL,培养温度36℃,摇床转速220 r·min<sup>-1</sup>,培养时间36 h。经验证,优化后发酵液中生物量为6.55×10<sup>9</sup> CFU·mL<sup>-1</sup>,芽孢产量为6.16×10<sup>9</sup> CFU·mL<sup>-1</sup>,芽孢产量较优化前提高了8.48倍。最后在中试培养条件下,发酵36 h后芽孢产量最高为7.33×10<sup>9</sup> CFU·mL<sup>-1</sup>,验证了摇瓶优化条件的稳定性。<b>[结论]</b> 采用单因素试验与响应面法相结合的方法优化发酵工艺,可显著提高NTGB-178的生物量与芽孢产量,此发酵工艺为芽孢杆菌NTGB-178工业化扩大生产奠定了基础。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1031 1040 3331535 郑双凤, 谭武贵, 丰来, 罗志威, 徐滔明, 张冬雪, 谭石勇 接种复合菌剂对牛粪好氧堆肥进程及温室气体(CH<sub>4</sub>和N<sub>2</sub>O)排放的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706013 <b>[目的]</b> 畜禽粪便好氧堆肥是实现废弃物稳定化、无害化和资源化的重要途径,但在实施过程中往往进度较慢,同时会产生大量温室气体污染环境。评估接种特定微生物后对畜禽粪便堆肥进程及温室气体产生的影响可为开发相应改良堆肥的菌剂产品提供理论依据。<b>[方法]</b> 设置牛粪好氧条垛式堆肥试验,通过常规理化指标测定、静态暗箱法和荧光定量PCR分别研究了接种含解淀粉芽孢杆菌和灰绿曲霉的复合菌剂对牛粪堆肥进程、温室气体(CH<sub>4</sub>和N<sub>2</sub>O)产生和相关功能基因丰度的影响。<b>[结果]</b> 接种复合菌剂加快了堆体升温,堆肥3 d即超过60.0℃,最高温度达到74.0℃;对照处理堆肥9 d时温度才达到60.0℃以上,最高温度为69.7℃。堆肥接菌处理后与对照相比pH值和含水率均下降,而电导率相差不大。接种复合菌剂显著降低堆体的C/N,在22 d时已下降至12.8,而对照处理至32 d才下降至12.5;2个处理间的铵硝含量相差不大。不同处理堆肥的CH<sub>4</sub>与N<sub>2</sub>O排放均呈此消彼长的趋势,其中CH<sub>4</sub>排放主要集中在堆肥前期,且接种复合菌剂显著降低了CH<sub>4</sub>排放通量(峰值排放通量分别为894.9和1 241.4 mg·m<sup>-2</sup>·h<sup>-1</sup>)。定量PCR结果表明:接菌处理显著降低了甲烷产生相关功能基因<i>mcrA</i>的丰度,而增加了甲烷氧化相关功能基因<i>pmoA</i>的丰度。N<sub>2</sub>O排放主要集中在堆肥后期,2个处理间排放通量相差不大,相关功能基因(<i>amoA、nirK</i>和<i>nosZ</i>)的丰度变化趋势也比较接近。<b>[结论]</b> 牛粪好氧堆肥中接种复合菌剂可有效加速堆体升温,延长堆肥高温期时间,加速堆肥腐熟进程,同时减少温室气体CH<sub>4</sub>的排放,有利于实现堆肥快速腐熟及无害化。该技术可为优化高温好氧堆肥处理牛粪等固体废弃物提供理论依据与技术支持。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1041 1050 1611644 李舒清<sup>1</sup>, 张镜丹<sup>1</sup>, 纪程<sup>1</sup>, 顾文文<sup>2</sup>, 李荣<sup>1</sup>, 邹建文<sup>1</sup> 火烧对黄土高原草地土壤氮素净矿化速率和净硝化速率的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706014 <b>[目的]</b> 封育是半干旱地区退化草地植被恢复的有效措施。封育后植被恢复会形成大量的凋落物,从而引起自然或人为火烧。火烧改变了土壤微生物特性和养分动态。本文旨在探究火烧对黄土高原典型草地养分(特别是氮)循环的影响。<b>[方法]</b> 以宁夏回族自治区云雾山国家级自然保护区封育34年的典型草地作为研究对象,分别采集新烧地、火烧后1年和火烧后2年的对照和火烧土壤样品(共计6个处理),比较分析土壤上层(0~5 cm)和下层(5~25 cm)总碳、总氮含量,无机态氮(铵态氮和硝态氮)含量,微生物生物量碳、氮含量,氮素净矿化速率和氮素净硝化速率等指标的变化。<b>[结果]</b> 火烧处理仅显著影响了上层土壤的性质。火烧显著降低了新烧地上层土壤的总氮含量、微生物生物量碳和氮含量;同时,新烧地上层的铵态氮、硝态氮、无机态氮含量和土壤基础呼吸显著高于对照,而火烧后2年则显著低于对照;土壤氮素净矿化速率和净硝化速率均随火烧年限的增加而呈现出先升高后降低的变化趋势。<b>[结论]</b> 火烧提高了短时期内黄土高原典型草地土壤的氮素可利用性和微生物活性,有利于新植物的生长。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1051 1057 1315696 张琳<sup>1</sup>, 王益<sup>2</sup>, 舒梦<sup>1</sup>, 张艺<sup>1</sup>, 李真<sup>1</sup>, 郭辉<sup>1</sup>, 李春越<sup>3</sup>, 胡水金<sup>1,4</sup> 生物聚沉氧化法快速处理奶牛场粪污废水的研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706015 <b>[目的]</b> 生物聚沉氧化法是一种利用产絮凝剂的微生物对粪污进行处理,然后固液分离去除粪污中的悬浮固体(SS),继而采用常规的生化方法处理固液分离后清澈废水的方法。<b>[方法]</b> 针对奶牛场固液分离所产生的"浓浆水"高含固率、高化学需氧量(COD)和高氨氮的特点,通过摇瓶培养试验、中试试验和序批式活性污泥法(SBR)处理试验,研究不同处理下生物聚沉氧化法对奶牛场粪污除渣和生物净化的效果。<b>[结果]</b> 奶牛场粪污经生物聚沉处理后脱水效果得到了提高,比阻大幅度降低:粪污比阻从初始9.8×10<sup>13</sup> m·kg<sup>-1</sup>下降到24 h时的0.73×10<sup>12</sup> m·kg<sup>-1</sup>,降低了99.26%。在最佳处理条件下进行多批次中试研究,并采用隔膜厢式压滤机进行压滤脱水。经生物聚沉反应后,压滤机粪污处理量大幅度提高,其压滤粪饼含水率在60.90%左右,比原始稀释粪污压滤粪饼体积减少了近87.09%,达到了粪污明显减量化的目的,且粪饼干基有机质含量几乎不损失,有利于后续资源化利用。此外,压滤出水中COD、SS、总氮(TN)、氨氮(NH<sub>3</sub>-N)和总磷(TP)含量分别从原始粪污的91 470、69 500、5 125、957和129 mg·L<sup>-1</sup>一步降低到1 776、&lt;10、262、236和1.89 mg·L<sup>-1</sup>,去除率分别达到98.06%、99.98%、94.89%、75.34%和98.53%。压滤水再经SBR工艺处理,出水水质基本达到国家标准《畜禽养殖业污染物排放标准:GB 18596-2001》,出水可用于奶牛场自身牛舍冲洗用水和绿化用水等,生物聚沉氧化法系统处理时间不足48 h,比传统工艺时间大幅缩短。<b>[结论]</b> 采用生物聚沉氧化法处理处置奶牛场粪污具有较高的潜在应用价值。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1058 1064 1088628 覃孔昌, 颜成, 王电站, 崔春红, 周立祥 不同施肥方式下土壤颗粒稳定性及其对四环素吸附能力的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706016 <b>[目的]</b> 针对不同施肥方式的农田,分析土壤胶体的稳定性及其对四环素的吸附能力,探讨四环素在土壤中的胶体运移性变化。<b>[方法]</b> 设置不施肥对照(CK)、单施化肥(NPK)和施用有机肥(OF)3种处理,湿筛沉降法筛分制备0.053~2 mm,0.002~0.053 mm和&lt;0.002 mm (土壤胶体)3个粒径组土壤颗粒,采用静置沉降和动态激光散射技术分析土壤颗粒的分散稳定性,探讨不同电解质条件下土壤胶体的凝聚动力学,用zeta电位测定仪测定不同电解质溶液下土壤胶体表面电位的变化。最后,通过吸附动力学和等温吸附试验分析不同粒径组土壤颗粒对四环素的吸附能力。<b>[结果]</b> CK处理中土壤胶体含量最高,且更容易凝聚,稳定性最差;施用有机肥显著提高了土壤中大颗粒(0.053~2 mm)含量,减少了土壤胶体的释放。土壤胶体临界凝絮浓度从大到小的处理分别为OF、NPK、CK。土壤颗粒对四环素的吸附能力在OF处理中最强;土壤胶体对四环素的吸附能力均远大于其他粒径的土壤颗粒和原土。<b>[结论]</b> 施用有机肥更有利于土壤大颗粒的形成,未团聚土壤胶体粒级更小,zeta电位更负,在水体中稳定性更强,对四环素的吸附能力也更强。因此,施用有机肥可有效减少土壤中胶体的释放,并能提高胶体在水体中的稳定性及对污染物四环素的吸附,从而影响污染物四环素在土壤中的分布和迁移。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1065 1073 1726482 蔡天晋, 戴越, 单培源, 姜灿烂, 杜雨昕, 赵言文, 蔡天明, 陈立伟 新疆北部地区与其他地区变性土壤线性膨胀系数的差异及矿物学机制 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706017 <b>[目的]</b> 比较不同亚纲变性土之间线性膨胀系数的差异,并通过对比不同亚纲土壤物理属性,解释产生差异的内在机制。<b>[方法]</b> 新疆北部地区(简称北疆地区)是夏旱变性土(含变性土壤)主要分布区,本研究调查了具有变性特征的14个土壤剖面,并搜集了我国其他12个省市140个变性土剖面相关数据,分析了不同亚纲变性土的线性膨胀系数(coefficient of linear extensibility,COLE)、黏粒和蒙皂石含量及其相关关系。<b>[结果]</b> 北疆地区夏旱变性土(含变性土壤)的COLE、黏粒和蒙皂石含量在5个亚纲中最低,其土壤膨胀收缩特性主要受伊利石-蒙皂石混合型矿物组成和混层比的影响,而其他4个亚纲较夏旱变性土(含变性土壤)具有更明显的变性特征。潮湿变性土、湿润变性土和夏旱变性土(含变性土壤)0~100 cm土层的黏粒和蒙皂石含量大于0~30 cm土层,而干润变性土0~30 cm土层含量高于0~100 cm土层。寒变性土随着剖面深度的增加,黏粒和蒙皂石含量无明显变化。潮湿变性土0~100 cm土层蒙皂石含量显著高于干润变性土和夏旱变性土(含变性土壤),且0~100 cm土层的COLE值也显著高于夏旱变性土(含变性土壤),5个亚纲表层土壤的COLE差异不显著。随着黏粒含量的增加,干润变性土蒙皂石含量和潮湿变性土COLE随之增大,表层蒙皂石含量对COLE影响更大。<b>[结论]</b> 北疆地区蒙皂石和伊利石-蒙皂石混合型矿物组成是土壤变性的内在影响因素,变性土中蒙皂石与黏粒呈线性相关,黏土矿物组成对表层土壤膨胀收缩有决定性作用。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1074 1080 1320826 张佩佩<sup>1</sup>, 张文太<sup>1</sup>, 贾宏涛<sup>1</sup>, 姜小三<sup>1,2</sup>, 武红旗<sup>1</sup>, 朱磊<sup>1</sup> 注射ACTH对断奶母猪卵泡促黄体素受体表达及卵泡液中类固醇激素合成的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706018 <b>[目的]</b> 为了探讨应激对断奶母猪繁殖障碍的影响机制,本试验以促肾上腺皮质激素(ACTH)注射所致的应激模型来研究应激对断奶母猪卵泡液中类固醇激素合成及卵泡促黄体素受体表达的影响。<b>[方法]</b> 对10头苏淮断奶母猪进行颈静脉插管手术,随机均分为对照组与ACTH处理组(<i>n</i>=5)。手术第3天开始以每次间隔8 h给ACTH处理组母猪注射ACTH (1 IU·kg<sup>-1</sup>),对照组母猪注射生理盐水,连续注射7 d。利用ELISA方法检测受试母猪卵泡液中类固醇激素及血浆中皮质醇的含量变化;利用荧光定量PCR测定胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)、17α-羟化酶(CYP17A1)、芳香化酶(CYP19A1)、类固醇激素合成急性期调节蛋白(StAR)、3β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、促黄体素受体(LHR)等基因的表达;利用免疫组化法检测CYP17A1、CYP19A1、LHR和3β-HSD蛋白的表达。<b>[结果]</b> 人工注射ACTH后40%的受试母猪出现排卵障碍;其血浆中皮质醇的含量极显著升高(<i>P</i>&lt;0.01);母猪卵泡液中雌二醇、雄烯二酮含量均显著下降(<i>P</i>&lt;0.05);<i>CYP17A1、CYP19A1、LHR</i>和<i>3β-HSD</i>基因表达量降低,其编码的蛋白CYP17A1、CYP19A1、LHR和3β-HSD表达量也明显下降。<b>[结论]</b> ACTH注射所致应激过程中,受试母猪的皮质醇含量升高可导致类固醇合成酶的基因、蛋白表达量明显下降,从而影响类固醇激素的合成及卵泡的发育。类固醇激素合成降低及LHR的低表达影响断奶母猪的正常排卵。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1081 1087 2432190 朱怀森<sup>1</sup>, 钱庄<sup>1</sup>, 杨东风<sup>2</sup>, 刘洪林<sup>3</sup>, 鲍恩东<sup>1</sup> 奶牛乳液中伊丽莎白菌按蚊亚种高度同源株的分离与鉴定 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706019 <b>[目的]</b> 本文旨在从患乳房炎的奶牛乳液中分离鉴定病原菌。<b>[方法]</b> 收集患乳房炎奶牛的乳液病料后分别接种绵羊血液平板和麦康凯鉴别培养基,置于37℃培养箱过夜。观察获得的单菌落形态并接种含有血清的液体培养基富集培养,然后煮沸法提取细菌纯培养物的基因组,以该基因组为模板通过PCR扩增未知细菌的核糖体RNA序列并对产物进行测序分析。以不同培养时间测定菌液<i>D</i><sub>600</sub>并绘制细菌的生长曲线。用倍比稀释法在96孔板上测定细菌对不同药物的最小抑菌浓度。<b>[结果]</b> 从病料中分离到一株革兰阴性菌,命名为JS20170427COW。该菌无运动性,在绵羊血平板上菌落圆形、光滑、淡黄色、边界清晰。生化试验和16S rRNA序列分析结果显示,其与伊丽莎白按蚊亚种人源株KT768343.1同源性达95%,称之为伊丽莎白按蚊亚种高度同源株。药敏试验显示,该菌对杆菌肽、溶菌素、硫酸黏菌素、乳酸菌素以及多肽类药物等耐药。<b>[结论]</b> 从病牛乳液中分离到一株与伊丽莎白菌按蚊亚种同源性高达95%的细菌,其具有公共卫生的潜在意义。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1088 1093 1624427 潘子豪, 龚倩梅, 李科茫, 马慧, 吴宗福, 姚火春 Cep70的细胞定位分析及在微管聚合中的作用研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706020 <b>[目的]</b> 本试验旨在研究Cep70的细胞定位及其在微管聚合中的调节作用。<b>[方法]</b> 利用原核表达质粒pMALp2T-<i>Cep70</i>,在细菌中诱导表达融合蛋白MBP-Cep70。用融合蛋白免疫小鼠,获得特异性的抗Cep70抗体。首先用该抗体对细胞进行免疫荧光显微分析,检测Cep70在细胞内的定位,再利用荧光标记的微管体外组装试剂盒研究Cep70在体外微管聚合中对微管形态的调节,最后利用微管混浊度试验,验证Cep70对微管聚合的功能影响。<b>[结果]</b> 通过从细菌中诱导纯化蛋白,获得了大量高纯度的融合蛋白MBP-Cep70。纯化蛋白免疫小鼠后得到了靶向Cep70的抗体。免疫荧光显微分析发现Cep70定位在微管组织中心(MTOC),即中心体上。通过对荧光标记的微管蛋白进行体外组装分析,发现Cep70增加了体外聚合微管的长度。进一步通过微管浑浊度试验,发现Cep70促进了体外微管的聚合。<b>[结论]</b> Cep70在细胞内定位在微管组织中心上,且在体外微管聚合上具有一定促进作用。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1094 1099 1458042 张俞, 史兴娟 黄牛呼吸道IgA分泌细胞和淋巴组织分布的研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706021 <b>[目的]</b> IgA在呼吸道抵抗外来病原微生物的黏膜免疫中发挥着至关重要的作用,了解黄牛呼吸道IgA分泌细胞和淋巴组织的分布尤为重要。<b>[方法]</b> 本试验运用免疫组织化学技术和组织学技术对5头7岁健康婆罗门黄牛的鼻黏膜、气管、肺内支气管、肺组织的IgA分泌细胞和淋巴组织的分布进行了详细研究。<b>[结果]</b> 黄牛的鼻黏膜、气管、肺内支气管、肺中均分布有IgA分泌细胞,且主要分布于黏膜上皮下以及腺体周围。其数量在鼻黏膜中最多,气管次之,肺内支气管和肺组织中IgA分泌细胞较少。此外,从鼻黏膜到肺内支气管黏膜下均分布有较多的淋巴组织。<b>[结论]</b> 黄牛鼻腔黏膜是较好的黏膜免疫诱导位点。该结果为牛呼吸道黏膜免疫及呼吸道疾病防治提供了理论依据。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1100 1104 3687605 李乙江<sup>1,2</sup>, 杨晶晶<sup>1</sup>, 牛自兵<sup>3</sup>, 创向辉<sup>2</sup>, 杨倩<sup>1</sup> 猪可食性组织中氟尼辛残留量的UPLC-MS/MS检测方法的建立 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706022 <b>[目的]</b> 建立一种可靠、快速、灵敏的超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)用于猪可食性组织中氟尼辛残留量的检测。<b>[方法]</b> 猪可食性组织(肌肉、皮脂、肝脏、肾脏)经绞碎、均质后,用乙酸乙酯-乙腈(体积比1:1)提取,MCX固相萃取柱净化,Acquity UPLC BEH C<sub>18</sub>色谱柱梯度洗脱,在电喷雾正离子(ESI<sup>+</sup>)下选用多反应监测(MRM)模式进行待测物的分析,外标法定量。<b>[结果]</b> 该方法的检测限(LOD)与定量限(LOQ)分别为0.5 μg·kg<sup>-1</sup>和1.0 μg·kg<sup>-1</sup>;待测物氟尼辛含量在0.5~500 μg·kg<sup>-1</sup>范围内,峰面积与药含量呈良好的线性关系(<i>R</i><sup>2</sup>&gt;0.999);氟尼辛在猪肌肉、皮脂、肝脏、肾脏组织中的添加回收率为74.8%~90.3%,批内精密度及批间精密度均不大于16.5%。<b>[结论]</b> 建立了猪超高效液相色谱-串联质谱检测方法,适用于猪可食性组织中氟尼辛残留量的测定。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1105 1110 1307897 罗小清, 张珍瑞, 郭凡溪, 郭洋洋, 吴峰, 余祖功 精氨酸对子宫内发育迟缓仔猪抗氧化功能和精氨酸代谢的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706023 <b>[目的]</b> 本文旨在研究精氨酸对子宫内发育迟缓(IUGR)仔猪抗氧化功能和精氨酸代谢的影响。<b>[方法]</b> 选择6头胎次和体况相近的妊娠母猪,分娩后,分别从每头母猪所产仔猪中挑选1头正常初生体质量(NBM)新生仔猪和2头IUGR新生仔猪,即6头NBM新生仔猪和12头IUGR新生仔猪。所有IUGR仔猪随机分成2组,分别饲喂基础人工乳(IUGR组,<i>n</i>=6)和添加6 g·L<sup>-1</sup>精氨酸(Arg)的基础人工乳(IUGR+Arg组,<i>n</i>=6),所有NBM仔猪饲喂基础人工乳(NBM组,<i>n</i>=6),试验期7 d。<b>[结果]</b> 与IUGR组相比,日粮补充Arg均显著降低IUGR仔猪背最长肌和空肠黏膜丙二醛(MDA)含量(<i>P</i>&lt;0.05);显著提高空肠黏膜总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性(<i>P</i>&lt;0.05);显著提高血清一氧化氮(NO)水平、总NO合酶(TNOS)、诱导型NO合酶(iNOS)、结构型NO合酶(cNOS)活性,空肠黏膜NO水平、TNOS和cNOS活性,以及空肠黏膜与血清中Arg水平和Arg代谢相关氨基酸(Arg、Cit和Pro)水平。<b>[结论]</b> 在早期断奶IUGR仔猪日粮中添加精氨酸具有增强IUGR仔猪抗氧化功能和促进精氨酸代谢的作用。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1111 1118 987270 张莉莉, 王远孝, 孔一力, 周根来, 王超, 钟翔, 王恬 抑制素α亚基基因<i>5’UTR</i>区在苏淮猪中的多态性分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706024 <b>[目的]</b> 探究抑制素α亚基基因(<i>INHA</i>)<i>5’UTR</i>区多态性与苏淮猪产仔数相关性,为苏淮猪的分子选育工作提供理论依据。<b>[方法]</b> 选取189头健康苏淮母猪,通过PCR扩增和测序对<i>INHA</i>基因<i>5’UTR</i>区基因多态性进行了检测,同时利用生物信息学方法分析该序列特征,最后通过群体遗传学和生物信息学分析了不同基因型对苏淮猪产仔数的影响。<b>[结果]</b> 在苏淮猪<i>INHA</i>基因<i>5’UTR</i>调控区<i>-42G</i> &gt;<i>A</i>处发现一个SNP位点,对其进行多态性分析,存在3种基因型,分别为GG、GA、AA,且基因型分布不符合哈代温伯格定律(<i>P</i>&lt;0.01)。G等位基因为优势等位基因,GG型为优势基因型,GG型苏淮猪的平均总产仔数比AA型多0.63头(<i>P</i>&lt;0.05)。<b>[结论]</b> <i>INHA</i>基因<i>5’UTR</i>区多态性可用于苏淮猪繁殖性状的分子标记辅助选择,加速育种进程。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1119 1124 2046625 刘晨<sup>1</sup>, 魏全伟<sup>1</sup>, 李平华<sup>1,2</sup>, 吴燕<sup>1,3</sup>, 吴望军<sup>1,2</sup>, 李强<sup>1,3</sup>, 黄瑞华<sup>1,2</sup>, 石放雄<sup>1,2</sup> 微冻液快速冷冻对猪背最长肌加工品质的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201706025 <b>[目的]</b> 本文旨在研究微冻液快速冷冻与常规冷冻2种冷冻处理猪背最长肌对加工调理猪肉饼品质的影响。<b>[方法]</b> 以宰后24 h的猪背最长肌为原材料,采用微冻液快速冷冻和常规冷冻分别将猪背最长肌冷冻至中心温度-18℃,并在-18℃冻库内冻藏45和90 d后解冻,加工成调理猪肉饼,测定2种不同冷冻处理对其硫代巴比妥酸(TBARS)值、出品率、真空贮藏损失、色差(亮度<i>L</i><sup>*</sup>、红度<i>a</i><sup>*</sup>、黄度<i>b</i><sup>*</sup>)和质构(回复性、弹性、胶黏性、硬度)的影响。<b>[结果]</b> 与常规冷冻相比,冻藏45和90 d时,微冻液快速冷冻能显著提高调理猪肉饼的出品率,降低真空贮藏损失(<i>P</i>&lt;0.05)。微冻液快速冷冻和常规冷冻对猪肉饼的<i>L</i><sup>*</sup>、<i>a</i><sup>*</sup>、和<i>b</i><sup>*</sup>值无显著影响(<i>P</i>&gt;0.05)。不同冻藏时间对调理猪肉饼TBARS值影响显著,常规冷冻处理加工的调理猪肉饼TBARS值显著高于微冻液快速冷冻处理。随冷冻时间延长由猪背最长肌加工的调理猪肉饼的硬度、弹性、胶黏性、回复性显著性降低,但微冻液快速冷冻下降趋势小于常规冷冻。微冻液快速冷冻处理可显著改善调理猪肉饼的回复性、弹性、胶黏性,但硬度值较大。<b>[结论]</b> 微冻液快速冷冻处理猪肉可提高猪肉饼产品品质,在调理肉品加工行业中可推广应用。 2017年11月10 00:00 2017年6期 1125 1130 1010487 程玉平, 康大成, 张舒翔, 周光宏, 张万刚