南京农业大学学报 /oa 封面 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190400 2019年07月08 00:00 2019年4期 0 0 3009402 目录 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904000 2019年07月08 00:00 2019年4期 0 0 804955 园艺作物果实液泡糖、酸转运与转化研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904001 糖、酸是果实风味的重要组成部分。作为糖、酸等代谢物的主要贮藏场所,液泡在园艺作物果实风味形成过程中起重要作用。液泡中糖、酸组成受膜载体转运特性及液泡内代谢酶催化特性的协同影响。本文总结了园艺作物果实液泡膜糖、酸转运载体类型及其转运特性,探讨了质子泵在液泡糖、酸积累过程中的作用,并对液泡内糖、酸转化的研究进展进行了概述。在此基础之上,整合并构建了园艺作物果实液泡糖、酸转运与转化的初级模型,以期为后续研究提供指导。 2019年07月08 00:00 2019年4期 583 593 1613663 张绍铃, 贾璐婷, 王利斌, 张臻 我国设施园艺发展现状与趋势 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904002 21世纪以来,我国设施园艺取得了长足进步,已经成为全世界设施园艺面积最大的国家,占世界总面积的85%以上,在农业和农村经济发展、乡村振兴中发挥着越来越重要的作用。本文从我国园艺设施的类型、种植结构、规模、效益和国民经济中的地位等方面,简述我国设施园艺发展概况,并总结了我国设施园艺在工程装备、地域分布、标准化、节本增效、连作障碍防控、无土栽培、物联网等方面取得的主要成就,概括了我国设施园艺的主要特点,同时从产业布局、装备水平、产品质量、科技支撑、社会服务水平、生产效益、产品保鲜加工等方面分析了我国设施园艺发展进程中存在的问题和不足,最后结合近年来设施园艺领域的技术进步和最新发展动态,探讨了我国设施园艺今后的发展趋势。 2019年07月08 00:00 2019年4期 594 604 1040220 孙锦, 高洪波, 田婧, 王军伟, 杜长霞, 郭世荣 <i>L</i>-茶氨酸的生物学功能及其在畜禽生产中的应用 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904003 <i>L</i>-茶氨酸是茶叶的特征性非蛋白质氨基酸,具有多种有益生物学功能。近年来,将其作为一种功能性饲料添加剂应用于畜禽生产已见报道,展现出了巨大的潜能。本文主要综述了<i>L</i>-茶氨酸的抗氧化和免疫调节功能及其在畜禽生产中的应用现状,旨在为<i>L</i>-茶氨酸在畜禽生产中的合理应用提供依据。 2019年07月08 00:00 2019年4期 605 611 1000212 张成, 耿照玉, 赵晓惠 水稻粒质量和粒形QTL定位及粒长位点<i>qGL3.2</i>的鉴定 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904004 <b>[目的]</b>通过水稻粒质量和粒形相关基因的QTL分析,挖掘普通野生稻(<i>Oryza rufipogon</i> Griff.)中优异基因,为高产水稻资源的鉴定与品种改良提供研究基础和创新材料。<b>[方法]</b>以籼稻品种‘9311’为受体亲本,普通野生稻为供体亲本构建的染色体片段置换系群体为研究材料,考察2015、2016和2017年水稻种子千粒质量、粒长、粒宽和长宽比等性状,利用QTL IciMapping 4.1软件对控制籽粒大小的QTL进行定位分析。并利用‘9311’与小粒家系Q8衍生的次级F<sub>2</sub>群体验证第3染色体1个效应明显的QTL(<i>qGL3.2</i>)。<b>[结果]</b>3年共定位到16个QTL,分布于第2、3、6、8和11染色体上,解释遗传变异的4.52%~13.08%。‘9311’与Q8家系衍生的次级F<sub>2</sub>群体验证了标记Indel3-17和RM3646之间<i>qGL3.2</i>位点的真实性,其对千粒质量、粒宽和长宽比的贡献率分别为33.18%、8.76%和59.92%;对粒长的效应尤为明显,LOD值高达39.29,可解释表型变异的贡献率达61.43%。精细定位和测序分析表明<i>qGL3.2<i>在基因O</i>s03g0407400</i>编码区发生1个C-A的替换,导致蛋白翻译提前终止。对130份种质资源等位变异类型和籽粒长度的分析表明C-A等位变异与粒长高度相关。<b>[结论]</b><i>qGL3.2</i>位点<i>Os03g0407400</i>基因C-A突变对水稻粒质量和粒形有重要影响,这为该基因的进一步育种利用和分子标记辅助选择提供依据。 2019年07月08 00:00 2019年4期 612 621 1942294 游佳, 谷晗, 朱泽, 肖世卓, 王致远, 刘子文, 胡曼曼, 刘世家, 陈亮明, 刘喜, 田云录, 江玲, 刘玲珑 基于消费级无人机搭载数码相机监测小麦长势状况研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904005 <b>[目的]</b>本文旨在探究消费级无人机搭载数码相机更好地用于小麦长势快速监测。<b>[方法]</b>于2015—2017年开展涉及2个小麦品种和4个施氮水平处理的田间小区试验,在小麦关键生育期采用大疆精灵3专业版无人机自带的数码相机获取试验区数码影像,并提取6种颜色指数,同步取样并测定叶面积指数、叶片干物质量及叶片氮积累量等小麦长势信息,在小麦抽穗前、后及全生育期分别运用指数函数和随机森林算法定量分析长势信息与颜色指数的关系。<b>[结果]</b>在小麦各生长阶段,指数函数模型表现较好,可见光大气阻抗指数(visible atmospherically resistant index,VARI)、超红指数(excess red index,ExR)和归一化绿减红差值指数(normalized green minus red difference index,NGRDI)与叶面积指数、叶片干物质量和叶片氮积累量的相关性均表现较好,继而分别建立了基于VARI、ExR和NGRDI的叶面积指数(<i>R</i><sup>2</sup>=0.71~0.82)、叶片干物质量(<i>R</i><sup>2</sup>=0.42~0.71)和叶片氮积累量(<i>R</i><sup>2</sup>=0.52~0.76)的指数函数监测模型。独立试验数据的检验结果表明:在抽穗前及全生育期,ExR(<i>R</i><sup>2</sup>=0.45~0.70和0.42~0.62)监测模型估测的叶面积指数、叶片干物质量和叶片氮积累量与实测值拟合性更好,在抽穗后期,VARI(<i>R</i><sup>2</sup>=0.68~0.72)监测模型估测效果更好。<b>[结论]</b>结合小麦各生长阶段指数函数监测模型,利用无人机搭载数码相机可以快速无损监测小麦长势状况。 2019年07月08 00:00 2019年4期 622 631 2502755 江杰, 张泽宇, 曹强, 田永超, 朱艳, 曹卫星, 刘小军 取样后处理措施对小麦抗倒伏性状测定结果的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904006 <b>[目的]</b>本文旨在优化与改进小麦取样后的后处理措施,为提高抗倒伏性状测定结果的准确性提供依据。<b>[方法]</b>采用完全随机设计,设置2个试验:取样后3种放置方式(取样后去除根系、取样后保留根系和取样后保留根系并将根系浸泡在水中)与取样后7个放置时间(0、2、4、6、8、10和12 h)为试验条件;以基部第2节间剥除叶鞘后的7个放置时间(0、0.5、1、1.5、2、2.5和3 h)为试验条件,分析其对抗倒伏相关形态指标和茎秆化学成分的影响。<b>[结果]</b>随着放置时间的推移,取样后保留根系并将根系浸泡在水中的放置方式下小麦单茎鲜质量、重心高度、机械强度和抗倒伏指数在放置12 h内与对照无显著差异,可溶性糖、蔗糖和淀粉含量在放置10 h内与对照无显著差异。取样后保留根系放置方式下小麦单茎鲜质量、重心高度、机械强度、可溶性糖含量、蔗糖含量和淀粉含量在放置2 h内与对照均无显著差异。取样后去除根系放置方式下,单茎鲜质量、机械强度和淀粉含量在放置2 h时与对照差异显著。随着基部第2节间剥除叶鞘后放置时间的延长,机械强度、抗倒伏指数、可溶性糖含量、蔗糖含量和淀粉含量均呈现先降后升趋势,0.5 h内机械强度和抗倒伏指数变化较小,但可溶性糖、蔗糖和淀粉含量在0.5 h时分别比对照显著降低7.21%、5.63%和19.91%。放置方式和放置时间对纤维素、半纤维素和木质素含量均无显著影响。<b>[结论]</b>田间取样后保留根系并将根系浸泡在水中的放置方式下小麦植株抗倒伏性状测定结果稳定性较好,10 h内测定结果与对照无显著差异,取样后保留根系放置方式抗倒伏性状需在2 h内测完;同时基部节间剥除叶鞘后应立即进行相关性状的测定。 2019年07月08 00:00 2019年4期 632 640 1238188 邵庆勤<sup>1</sup>, 万成<sup>1</sup>, 李晓庆<sup>1</sup>, 任兰天<sup>1</sup>, 闫素辉<sup>1</sup>, 张从宇<sup>1</sup>, 倪鹤<sup>2</sup>, 李文阳<sup>1</sup> 种植密度对烤烟光合特性日变化及其主要化学成分的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904007 <b>[目的]</b>探讨种植密度对烤烟光合特性日变化及其主要化学成分的影响,为协调烤烟的碳、氮代谢,优化烤后烟叶化学成分的协调性提供理论依据。<b>[方法]</b>以烤烟(<i>Nicotiana tabacum</i> L.)品种‘K326’为试验材料,设置5个种植密度处理,即最小密度处理(T1,14 200株·hm<sup>-2</sup>)、较小密度处理(T2,15 400株·hm<sup>-2</sup>)、中等密度处理(T3,16 800株·hm<sup>-2</sup>)、较大密度处理(T4,18 500株·hm<sup>-2</sup>)、最大密度处理(T5,20 500株·hm<sup>-2</sup>),研究种植密度对烤烟光合特性和常规化学成分的影响。<b>[结果]</b>除最大密度处理外,其他处理烤烟净光合速率均呈双峰曲线,峰值出现在11:00和15:00;与最小密度处理相比,较小密度处理烤烟中部叶净光合速率、气孔导度、蒸腾速率分别提高14.59%、13.11%、3.25%,13:00之后胞间CO<sub>2</sub>浓度回升加快,气孔限制值逐渐下降,说明气孔限制得到有效缓解,有利于延长烟叶光合功能时间,烤后烟叶两糖比升高了4.40%,成熟度提高;最大密度处理的烤烟中部叶13:00之后净光合速率下降92.30%,胞间CO<sub>2</sub>浓度升高18.52%,气孔限制值下降17.50%,说明随着光合作用的进行,烟叶非气孔限制加剧,光合效率低,有效光合时间短,因此不利于干物质积累;净光合速率、气孔导度、蒸腾速率均与氮碱比呈极显著正相关,蒸腾速率与总糖呈显著正相关。<b>[结论]</b>与最大密度处理相比,较大和中等密度处理有利于优化烟株形态,协调烟叶光合速率,提高烤烟成熟度及碳、氮代谢协调性,实现优质烟叶生产。 2019年07月08 00:00 2019年4期 641 647 1577959 曹阳<sup>1</sup>, 文国宇<sup>2</sup>, 李茂军<sup>2</sup>, 王晓剑<sup>2</sup>, 雷佳<sup>3</sup>, 陈建军<sup>1</sup> 不结球白菜开花相关基因<i>BcGI</i>的克隆、亚细胞定位及基因沉默功能验证 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904008 <b>[目的]</b>本文旨在揭示不结球白菜<i>GIGANTEA</i>(<i>GI</i>)基因的功能,验证其与<i>CONSTANS</i>(<i>CO</i>)、<i>FLOWERING LOCUS T</i>(<i>FT</i>)基因之间的调控关系以及其在植物抽薹开花中的作用。<b>[方法]</b>以不结球白菜品种‘苏州青’为材料,提取RNA并反转录成cDNA,同源克隆<i>BcGI</i>基因,Gateway构建表达载体pEarleyGate101-<i>BcGI</i>-YFP,利用农杆菌介导法将表达载体注射入本氏烟草中,激光共聚焦显微镜观察其亚细胞定位。Gateway构建沉默载体<i>BcGI</i>-RNAi,利用农杆菌介导法将沉默载体导入拟南芥中,观察野生型和转基因植株抽薹期的表型变化。采用RT-qPCR技术,检测<i>GI、CO、FT</i>基因在转基因和野生型拟南芥植株抽薹期的基因表达量。<b>[结果]</b>通过同源克隆,得到<i>BcGI</i>基因,其含有1个3 516 bp的开放阅读框(ORF),编码1 171个氨基酸。亚细胞定位结果显示,BcGI定位于细胞核中。RT-qPCR结果表明,<i>BcGI</i>基因在沉默转基因植株中的相对表达量比野生型植株低;同时当<i>GI</i>基因表达受到抑制时,<i>CO、FT</i>基因在沉默转基因植株中的相对表达量也比野生型明显降低,沉默转基因植株与野生型相比表现为开花延迟且抽薹期莲座叶数明显增多。<b>[结论]</b>BcGI定位于细胞核,参与正向调控下游<i>CO、FT</i>基因的表达,进而影响不结球白菜光周期开花途径。 2019年07月08 00:00 2019年4期 648 656 5374875 王惠玉, 任海波, 李林, 刘同坤, 程奕秋, 侯喜林 菊花<i>CmGATA12</i>基因促进开花的分子机制 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904009 <b>[目的]</b>本文旨在探究菊花<i>CmGATA12</i>基因的功能,分析其表达特征,并转入拟南芥中对其功能进行初步研究。<b>[方法]</b>从菊花品种‘清露’中克隆获得<i>CmGATA12</i>全长序列,与其他物种进行同源性比对分析,同时利用实时荧光定量PCR分析<i>CmGATA12</i>在菊花不同组织中的表达变化;将<i>CmGATA12</i>基因转入拟南芥中,观察其对拟南芥开花时间和莲座叶片数的影响,并分析<i>CmGATA12</i>转基因拟南芥中相关开花基因的表达变化。<b>[结果]</b>CmGATA12与拟南芥GATA家族的AtGATA13和AtGATA8的遗传距离最近。组织定量分析表明<i>CmGATA12</i>在菊花的茎中表达量最高,在芽中表达量最低。亚细胞定位和转录活性试验表明,CmGATA12定位在细胞核和细胞膜并且具有转录激活活性。统计<i>CmGATA12</i>转基因拟南芥植株的开花时间和莲座叶片数发现,<i>CmGATA12</i>转基因拟南芥植株的开花时间均提前于野生型拟南芥植株,开花时的莲座叶片数均低于野生型拟南芥植株。<i>CmGATA12</i>转基因拟南芥植株相关开花基因的表达中,促进开花的基因<i>AtSPL5</i>和<i>AtGI</i>在<i>CmGATA12</i>转基因植株中较野生型拟南芥中的表达量上调,抑制开花的基因<i>AtSVP、AtFRI、AtTOE1</i>和<i>AtTOE2</i>在<i>CmGATA12</i>转基因植株中较野生型表达量下调。<b>[结论]</b>本研究克隆得到的菊花<i>CmGATA12</i>基因,具有促进拟南芥开花的功能。 2019年07月08 00:00 2019年4期 657 664 3353075 吴怀远, 赵楠, 王艺光, 刘伟鑫, 蒋甲福, 陈发棣 高通量测序技术分析进境高粱种子的真菌多样性 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904010 <b>[目的]</b>利用高通量测序技术对进口美国和澳大利亚的高粱种子真菌多样性进行分析,以期为筛查进口高粱携带真菌种类及检疫风险的评估提供科学依据。<b>[方法]</b>收集美国和澳大利亚的高粱种子24份,提取DNA,对ITS1区进行Illumina Hiseq高通量测序,通过真菌通用数据库(UNITE database)及自行构建的高粱病原真菌核心数据库,应用USEARCH 10.0软件对高通量测序数据进行生物信息学分析。<b>[结果]</b>质量控制后得到1 794 895条优化序列,聚类得到901个OTU(operational taxonomic units),测序已覆盖样品中绝大部分的真菌类群。多样性分析表明:2个国家的高粱种子携带的真菌数量相对稳定,但2个国家的高粱种子真菌群落结构差异显著,美国高粱主要真菌群落分布比澳大利亚均匀。2个国家进口高粱种子携带的真菌种类(属水平上)有:链格孢属、曲霉属、隐球菌属、附球菌属、镰刀菌属、戴维氏属、汉纳酵母属、球梗孢属、茎点霉属、耐干霉菌属、尾孢菌属、枝孢属、麦角菌属、旋孢腔菌属、刺盘孢属、弯孢霉属等。采用通用数据库有29个OTU比对到种水平;而采用高粱病原真菌核心数据库有47个OTU比对到种水平。<b>[结论]</b>通过高通量测序技术全面筛查进境高粱携带的病原真菌种类,一次性检出了多种重要的高粱病原真菌;并且构建高粱核心病原真菌数据库,可以显著提高鉴定到种的准确率,为快速筛查高粱病原真菌提供科学依据,为口岸科学评估进口高粱检疫风险提供技术支持。 2019年07月08 00:00 2019年4期 665 671 2373244 周密密<sup>1</sup>, 周欣<sup>2</sup>, 孙民琴<sup>3</sup>, 李彬<sup>1</sup>, 吴翠萍<sup>1</sup>, 蔡磊<sup>2</sup> 甜菜夜蛾黄素单加氧酶的原核表达及其对杀虫剂的代谢作用 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904011 <b>[目的]</b>采用原核表达技术对甜菜夜蛾的黄素单加氧酶(FMO)进行体外表达,获得具有活性的FMO酶,在此基础上开展对杀虫剂的代谢功能研究。<b>[方法]</b>通过将甜菜夜蛾<i>FMO</i>基因的开放阅读框构建到pET32a原核表达载体中,在大肠杆菌中表达目的蛋白,利用该载体的His标签使用镍柱对表达蛋白进行纯化,再通过咪唑梯度洗脱得到纯化的重组FMO酶蛋白。采用还原型辅酶Ⅱ(NADPH)法测定FMO酶的活性以及对杀虫剂的氧化活性,并用HPLC法分析FMO酶催化杀虫剂降解的能力,最后用液质联用技术鉴定代谢产物。<b>[结果]</b>通过原核表达技术成功得到可溶性的SeFMO2与SeFMO3酶,这2种酶对FMO的模式底物甲巯咪唑与苄达明均具有氧化活性,SeFMO2与SeFMO3对甲巯咪唑<i>S</i>-氧化的代谢动力学参数<i>K</i><sub>m</sub>值分别为37.59与3.00 μmol·L<sup>-1</sup>,对苄达明<i>N</i>-氧化的<i>K</i><sub>m</sub>值分别为165.98与17.71 μmol·L<sup>-1</sup>。对模式底物的<i>S</i>-氧化活性与<i>N</i>-氧化活性均是SeFMO3高于SeFMO2,2种酶的<i>S</i>-氧化活性均高于<i>N</i>-氧化活性。SeFMO2和SeFMO3对毒死蜱、硫双威以及溴虫腈具有一定的代谢活性,HPLC分析表明这2种FMO酶均能催化这3种杀虫剂的氧化降解,SeFMO2对毒死蜱、溴虫腈和硫双威的降解率依次是11.8%、11.5%和27.8%,SeFMO3对它们的降解率分别是28.8%、23.1%和30.2%,其中对硫双威的降解作用较强。对硫双威代谢产物的鉴定表明:FMO主要催化硫双威的硫醚氧化,形成硫双威的砜化合物。<b>[结论]</b>甜菜夜蛾黄素单加氧酶对外源物具有<i>S</i>-氧化活性与<i>N</i>-氧化活性,对某些杀虫剂具有氧化代谢能力,是昆虫的重要解毒酶系之一。 2019年07月08 00:00 2019年4期 672 681 2206254 汤雨洁, 田祥瑞, 胡波, 黄河, 薛圆, 苏建亚 河弧菌中群体感应系统相关基因及信号分子检测 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904012 <b>[目的]</b>本文旨在研究河弧菌在30和37℃条件下群体感应信号分子CAI-1、AI-2和<i>N</i>-酰基高丝氨酸内酯(AHL)的动态变化水平以及群体感应系统相关基因在不同来源河弧菌菌株中的分布及信号分子产生情况。<b>[方法]</b>制备待测菌株的无菌培养上清液,分别用群体感应信号分子CAI-1、AI-2和AHL特异性检测菌株MM920、BB170和KYC55上清液中相应的信号分子。PCR检测不同来源河弧菌中群体感应系统组成的相关基因。通过测定偶氮酪蛋白的方法检测HapA蛋白酶活性。<b>[结果]</b>在30和37℃的培养条件下,河弧菌参考菌株VF85003菌液上清液中CAI-1、AI-2和AHL信号分子水平均随菌体密度的增加而升高。相同菌体密度时,37℃培养上清液中的CAI-1和AI-2水平高于30℃培养的,但AHL水平均低于30℃培养的。对70株不同来源的河弧菌菌株进行PCR检测,发现其中45株河弧菌含有全部群体感应系统组成的相关基因;45株菌株上清液中大多数的CAI-1、AI-2和AHL信号分子水平分布在100~1 000的范围内,但并非所有菌株都具有这3种信号分子。45株河弧菌中有48.89%的菌株HapA蛋白酶活性检测为阳性,51.11%的菌株检测结果为阴性。<b>[结论]</b>VF85003培养上清液中CAI-1、AI-2和AHL信号分子水平呈密度依赖性升高,AHL信号分子的表达水平在温暖的环境(30℃)温度下较宿主温度(37℃)下更高,而CAI-1、AI-2信号分子则相反,在宿主温度(37℃)条件表达更高,提示其在河弧菌致病性和环境适应性生存方面的不同作用。群体感应系统组成基因的分布、3种信号分子表达水平和毒力因子金属蛋白酶HapA活性存在菌株间差异。 2019年07月08 00:00 2019年4期 682 688 1311587 胡晓<sup>1</sup>, 刁保卫<sup>2</sup>, 李杰<sup>2</sup>, 王卉<sup>1</sup>, 梁未丽<sup>2</sup> 不动杆菌K7对酚酸类化合物的降解效能 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904013 <b>[目的]</b>从宁夏中卫硒砂瓜种植区多年连作土壤中分离获得1株高效降解酚酸类物质的菌株,对其进行分类鉴定,并全面评估其对11种酚酸类物质的降解效能,以期为该菌在酚酸类自毒物质降解领域中的应用提供理论依据。<b>[方法]</b>通过形态特征和16S rRNA基因序列分析进行菌株鉴定;采用液相色谱串联二极管阵列检测器研究菌株对多种酚酸物质的降解特性。<b>[结果]</b>经生理生化及分子生物学鉴定,该菌株为不动杆菌属(<i>Acinetobacter</i> sp.),命名为K7。该菌株对4-羟基苯甲酸、香豆酸、香草酸、苯甲酸、阿魏酸和咖啡酸具有良好的降解效果,对丁香酸、香草醛、肉桂酸和没食子酸的降解效能较弱,不能降解水杨酸。以咖啡酸为代表,研究不同条件对菌株K7降解效能的影响,发现在中性偏碱(pH7~8)、较高温度(30~40℃)、咖啡酸初始浓度小于100 mg·L<sup>-1</sup>时,菌株K7对咖啡酸具有高效降解能力。<b>[结论]</b>不动杆菌K7对多种酚酸类化合物表现出良好的降解效能。 2019年07月08 00:00 2019年4期 689 696 2595242 李敏<sup>1,2</sup>, 屈欢<sup>1,2</sup>, 刘建利<sup>1,2</sup>, 代秀秀<sup>1</sup>, 司海丽<sup>1,2</sup>, 张琇<sup>1,2</sup>, 杨国平<sup>1,2</sup> 枯草芽胞杆菌WY8-7的溶磷、抑菌及促生长作用 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904014 <b>[目的]</b>本文旨在筛选兼有溶磷和抑菌作用的微生物菌株,分析其在水体和土壤中的溶磷效果以及对植物生长的作用,同时分析其抑菌活性,鉴定其抑菌物质。<b>[方法]</b>采用稀释涂平板法,从茶园土壤中分离具有溶磷和抑菌作用的菌株WY8-7,通过形态学、生理生化和分子生物学分析,确定菌株WY8-7的分类地位;检测菌株WY8-7在土壤和培养液中对难溶性无机磷的降解作用;检测其对苗期玉米植株生长的影响;对峙培养法分析菌株WY8-7对不同病原真菌的抑菌作用;超高效液相色谱四级杆飞行时间质谱鉴定抑菌功能物质。<b>[结果]</b>经鉴定,菌株WY8-7为枯草芽胞杆菌(<i>Bacillus subtilis</i>),在固体培养基、液体培养基和土壤中均可转化难溶性无机磷,提升可溶性磷含量;液体振荡培养20 d后,可溶性磷含量达512.77 mg·L<sup>-1</sup>,为对照的174倍;菌株WY8-7可提升土壤中可溶性磷含量,并促进苗期玉米的生长,与对照组相比,在叶长、叶宽、单叶叶面积、株高和鲜质量等指标均有显著增长(<i>P</i>&lt;0.05),增长率分别达17.68%、22.08%、42.62%、20.34%和20.59%;质谱分析表明,菌株WY8-7可产生伊枯草菌素A和丰原素A两类抑菌物质,对3种真菌具有高效广谱抑菌作用,对禾谷炭疽菌的抑菌率最高,达87.34%。<b>[结论]</b>分离自茶园的枯草芽胞杆菌WY8-7,在土壤和液体振荡培养中可高效转化难溶性无机磷为可溶性磷,促进苗期玉米植株生长,同时WY8-7还可产生伊枯草菌素A和丰原素A两种脂肽类物质,抑制多种病原真菌生长。WY8-7具有高效溶磷和抑菌作用,为新型微生物菌肥的研发提供重要材料。 2019年07月08 00:00 2019年4期 697 705 2884606 宫安东<sup>1</sup>, 孔宪巍<sup>1</sup>, 翟新可<sup>1</sup>, 路亚南<sup>1</sup>, 文淑婷<sup>1</sup>, 张静柏<sup>2</sup> ‘黄冠梨’钾转运体基因<i>PbKT8</i>的克隆与表达分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904015 <b>[目的]</b>本文旨在克隆‘黄冠梨’钾转运体<i>PbKT8</i>基因,对基因定位及表达特征进行初步分析,为其功能研究提供基础。<b>[方法]</b>从‘黄冠梨’果实中克隆<i>PbKT8</i>基因的cDNA全长序列,利用生物信息学对其同源序列进行分析,构建含GFP载体并通过激光共聚焦显微镜精确定位蛋白位置,实时荧光定量PCR分析不同施钾处理下该基因在果实成熟期的表达特征。<b>[结果]</b>钾转运体<i>PbKT8</i>基因序列全长2 328 bp,编码775个氨基酸,PbKT8蛋白与苹果(<i>Malus domestica</i>)进化关系最相近,同源序列相似性高达99.10%;亚细胞定位结果显示,PbKT8蛋白定位于细胞膜上;<i>PbKT8</i>基因转化酵母突变菌株R5421在低于5 mmol·L<sup>-1</sup> K<sup>+</sup>培养基上恢复生长;qRT-PCR结果表明,<i>PbKT8</i>基因在果实和叶片中相对表达量随施钾水平增加而上升。<b>[结论]</b>PbKT8蛋白定位在质膜上具有转运钾离子的功能,在果实成熟期受高钾响应表达。 2019年07月08 00:00 2019年4期 706 712 4921443 石晓倩<sup>1</sup>, 申长卫<sup>2</sup>, 刘慧冉<sup>1</sup>, 李岩<sup>1</sup>, 谢昶琰<sup>1</sup>, 杨晗<sup>1</sup>, 徐阳春<sup>1</sup>, 董彩霞<sup>1</sup> 厌氧消化对猪场废水中溶解性和颗粒态有机物的组成与性质的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904016 <b>[目的]</b>本文旨在探究厌氧过程中猪场废水组成与性质的变化,从微观变化分析沼液难于生化处理的深度原因,对猪场废水处理工艺的优化提供针对性的指导意见。<b>[方法]</b>采集猪场实际废水,利用全混式厌氧反应器(CSTR)对其进行厌氧发酵,探究猪场废水厌氧消化过程中的溶解性和颗粒态有机物组成与性质的变化,以评价厌氧消化对猪场废水可生化性的影响。<b>[结果]</b>随着猪场废水厌氧消化时间的延长,沼液水相的比紫外吸光度从初始值0.057提高到0.104 L·mg<sup>-1</sup>·cm<sup>-1</sup>。同时,亲水性有机物比例从初始的69.8%下降到16.2%。三维荧光光谱显示,随着厌氧消化的进行,可溶性有机物中腐殖酸等难降解有机物的特征峰增强,而易降解的蛋白类有机物特征峰明显减弱。不同厌氧时间的猪场沼液无论稀释与否,其颗粒态有机物(以化学需氧量衡量)水解率或溶解率(经12 h曝气处理)均较低,仅为-33.3%~28.6%。沼液中颗粒态有机物通过活性污泥吸附絮凝共沉降去除率也较低(-22.5%~19.4%)。<b>[结论]</b>猪场沼液中颗粒态有机物难于降解或靠活性污泥颗粒吸附絮凝共沉降而去除,且沼液中溶解性有机物结构随消化时间的延长趋于稳定,这2种因素是除猪场废水厌氧消化后氨氮含量较高、C/N严重失衡外,导致猪场沼液难以生化处理的另外重要原因。因此,适当缩短厌氧消化时间并在生化单元前端增加深度去除悬浮物(SS)单元是提高沼液后期生化处理效果的重要手段。 2019年07月08 00:00 2019年4期 713 720 2012915 邵一奇<sup>1</sup>, 王电站<sup>1</sup>, 颜成<sup>2</sup>, 张华生<sup>1</sup>, 周立祥<sup>1</sup> 合生元对保育猪生长性能、粪样菌群结构和短链脂肪酸含量的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904017 <b>[目的]</b>本试验旨在研究由2种益生菌和2种益生素合成的合生元对保育猪的益生作用并探讨其作用机制。<b>[方法]</b>240头体况相近的21日龄健康断奶仔猪,随机分为对照组和试验组,每组3个重复,每个重复40头仔猪。试验组通过饮水饲喂合生元,对照组正常饮水,试验期间记录采食量与体质量;于21、28、42和70日龄采集粪样样品,Hiseq测序分析粪样菌群结构,气相色谱测定粪样短链脂肪酸含量。<b>[结果]</b>合生元显著提高21~42日龄保育猪平均日采食量和平均日增重,降低腹泻率(<i>P</i>&lt;0.05);显著增加粪样短链脂肪酸含量,尤其是丁酸含量(<i>P</i>&lt;0.05)。合生元对粪样菌群多样性和丰富度无显著影响,但显著增加28日龄保育猪粪样中乳酸杆菌属以及42日龄保育猪普氏菌属的相对丰度(<i>P</i>&lt;0.05)。相关性分析表明,粪样中乙酸、丁酸含量与保育猪腹泻率显著负相关,与平均日增重和平均采食量显著正相关。<b>[结论]</b>补充合生元改变了断奶保育猪肠道菌群结构与代谢,提高了其生长性能。 2019年07月08 00:00 2019年4期 721 728 1537118 吕存<sup>1</sup>, 孙玉亭<sup>1</sup>, 胡传炯<sup>2</sup>, 纪宇<sup>2</sup>, 成艳芬<sup>1</sup>, 朱伟云<sup>1</sup> 犬脂肪间充质干细胞的分离、分化与鉴定 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904018 <b>[目的]</b>本试验旨在分离、多向诱导分化并鉴定犬脂肪间充质干细胞。<b>[方法]</b>无菌条件下采取经过健康筛查的犬腹部脂肪,机械剪碎,采用1 g·L<sup>-1</sup>胶原酶Ⅰ型消化,用DMEM+10% FBS培养,观察细胞形态特征,流式细胞术分析细胞表面抗原标志的表达,并检测其体外成脂、成骨、成软骨分化能力。<b>[结果]</b>运用酶消化法可以从犬新鲜脂肪组织中分离到脂肪间充质干细胞,流式分析结果显示其高表达CD29(99.9%),低表达CD34(0.5%)和CD45(0.3%)。这些细胞在体外经诱导可以分化成为骨、软骨和脂肪。<b>[结论]</b>犬腹部脂肪组织中分离得到脂肪间充质干细胞,这些细胞具有多向分化能力。 2019年07月08 00:00 2019年4期 729 733 2095413 文依信<sup>1</sup>, 贾绍昌<sup>2</sup>, 乐建铭<sup>1</sup>, 鲁希<sup>1</sup>, 邓茜文<sup>1</sup>, 赵炳枢<sup>1</sup>, 吴文达<sup>1</sup>, 张海彬<sup>1</sup> 乙型脑炎病毒感染猪睾丸细胞的miRNA表达谱差异分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904019 <b>[目的]</b>本试验旨在分析乙型脑炎病毒(JEV)感染猪睾丸(ST)细胞和正常ST细胞miRNA差异表达谱,以探索miRNA在JEV感染过程中的作用及其调控机制。<b>[方法]</b>分别提取正常ST细胞和JEV感染8 h后的ST细胞总RNA,利用高通量测序技术检测分析ST细胞中的miRNA表达谱并进行差异分析。使用miRanda软件对表达差异显著miRNA的靶基因进行预测并对靶基因进行GO分析。选取6个显著性差异表达的miRNA通过RT-qPCR进行验证。<b>[结果]</b>与正常ST细胞相比,JEV感染后的ST细胞有112个差异表达miRNA,其中80个miRNA上调表达,32个miRNA下调表达。经RT-qPCR方法验证6个差异表达的miRNA结果与高通量测序结果一致。差异表达miRNA靶基因的生物学功能相对集中在细胞代谢、细胞黏附等生物过程。<b>[结论]</b>检测和分析JEV感染后猪睾丸细胞的miRNA表达谱,获得了大量的与JEV感染相关的miRNA表达谱数据,为揭示JEV感染生殖系统致病机制提供了有效的数据和理论基础。 2019年07月08 00:00 2019年4期 734 739 1276974 张元鹏<sup>1</sup>, 杨占娜<sup>2</sup>, 杨利<sup>1</sup>, 李兰<sup>1</sup>, 于晓明<sup>1</sup>, 杜露平<sup>1</sup>, 陈瑾<sup>1</sup>, 侯立婷<sup>1</sup>, 乔绪稳<sup>1</sup>, 侯继波<sup>1</sup>, 郑其升<sup>1,3,4</sup> 雷帕霉素对大肠杆菌诱发的大鼠乳腺上皮细胞炎症反应的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904020 <b>[目的]</b>阐明雷帕霉素(Rapa)对大肠杆菌诱发的乳腺感染的保护作用机制,为临床上寻找乳腺炎防控新方法提供理论依据。<b>[方法]</b>原代培养大鼠乳腺上皮细胞,待细胞贴壁后,试验组采用100 nmol·L<sup>-1</sup>的Rapa处理4 h后,细胞经感染比(MOI)为10的大肠杆菌处理2 h后用细胞刮刀刮取细胞,收集细胞上清液,用于Toll样受体4(TLR-4)及髓样分化因子(MyD88)蛋白、促炎性细胞因子表达及活性氧(ROS)释放检测。<b>[结果]</b>大肠杆菌刺激原代培养的乳腺上皮细胞后,TLR-4和MyD88蛋白表达显著升高;而Rapa预处理可降低MyD88蛋白表达;同时,大肠杆菌刺激后,乳腺上皮细胞中促炎性细胞因子,如肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的表达及ROS的释放均显著升高。雷帕霉素能下调促炎性细胞因子的释放,显著降低ROS的释放量。<b>[结论]</b>Rapa抑制MyD88信号通路后可减轻大肠杆菌诱导的大鼠乳腺炎症反应。 2019年07月08 00:00 2019年4期 740 745 1342075 卢劲晔, 顾蓓蓓, 卢炜, 刘静 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对IPEC-J2细胞增殖、凋亡和屏障功能的影响及其自噬机制 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904021 <b>[目的]</b>本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对体外培养的仔猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)增殖、凋亡和屏障功能的影响,探讨DON的肠道毒性作用及相关机制。<b>[方法]</b>以不同浓度(0、0.5、1、2、4、8、和16 μmol·L<sup>-1</sup>) DON处理IPEC-J2细胞24 h后,采用MTT、Hoechst 33258、Western blot、Millipore-ERS和IFA法检测DON对IPEC-J2细胞增殖、凋亡、屏障功能和自噬水平的影响;在4 μmol·L<sup>-1</sup> DON处理组添加自噬激活剂雷帕霉素(Rapa)来提高细胞的自噬水平,用上述方法检测Rapa对DON引起的IPEC-J2细胞增殖毒性、凋亡和屏障功能的影响。<b>[结果]</b>与对照组相比,当DON浓度为4、8和16 μmol·L<sup>-1</sup>时,细胞活性显著(<i>P</i>&lt;0.05)或极显著(<i>P</i>&lt;0.01)下降。4和8 μmol·L<sup>-1</sup> DON处理凋亡细胞数量和凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3表达显著增加(<i>P</i>&lt;0.01),细胞跨膜电阻(TEER)值和紧密连接蛋白Occludin表达显著下降(<i>P</i>&lt;0.05),自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和Atg5表达显著下降(<i>P</i>&lt;0.05)。添加Rapa可以显著缓解DON引起的细胞毒性、凋亡和屏障功能障碍。<b>[结论]</b>DON通过抑制自噬引起IPEC-J2细胞增殖下降、凋亡增加和屏障功能障碍。 2019年07月08 00:00 2019年4期 746 751 1851049 萧晟<sup>1,2</sup>, 刘丹丹<sup>2</sup>, 甘芳<sup>2</sup>, 黄克和<sup>2</sup> 铅胁迫对小鼠精子发生和精子活力的影响及机制 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904022 <b>[目的]</b>本文旨在探讨铅对小鼠精子发生和精子活力的影响及机制。<b>[方法]</b>建立铅胁迫试验小鼠模型;涂片观察精液品质并拍照;制备精子悬液,用穗加精液分析(SSA)自动检测系统测定精子运动学参数及精子活力参数;用荧光定量PCR检测<i>Oct4、DAZ1、SCP3、Tsc21、ACR、Acrv1、cyclinA1、SPATA46</i>和<i>LDH-C4</i>基因的表达水平;观察睾丸组织形态,计数生精小管数和生精细胞数。<b>[结果]</b>与对照组相比,铅胁迫下小鼠活动精子的比例低于50%,精子形态普遍异常;精子曲线运动速度、直线运动速度、平均路径速度、精子头侧摆幅度、鞭打频率、平均角位移与对照组相比均极显著下降(<i>P</i>&lt;0.001),精子运动的直线性、前向性、摆动性与对照组相比无显著差异(<i>P</i>&gt;0.05),精子活力极显著下降(<i>P</i>&lt;0.001);<i>Oct4</i>和<i>DAZ1</i>基因表达水平极显著降低(<i>P</i>&lt;0.001),<i>SCP3、ACR</i>和<i>Acrv1</i>基因表达水平极显著下降(<i>P</i>&lt;0.01),<i>cyclinA1</i>和<i>SPATA46</i>基因表达水平显著降低(<i>P</i>&lt;0.05),而<i>Tsc21</i>和<i>LDH-C4</i>基因表达水平无显著差异(<i>P</i>&gt;0.05)。睾丸生精小管和生精细胞数均极显著减少(<i>P</i>&lt;0.001),部分生精细胞坏死,并在生精细胞坏死集中区域可见支持细胞增多,未见成熟的精子,睾丸间质炎性浸润,间质细胞数明显减少。<b>[结论]</b>铅胁迫可引起睾丸间质细胞损伤和生精障碍。铅可能通过下调<i>Oct4、DAZ1、SCP3</i>和<i>SPATA46</i>基因表达,使精子数量减少,精子成熟停滞,畸形精子数增加,精子活力下降。 2019年07月08 00:00 2019年4期 752 758 2321627 杨治河<sup>1</sup>, 邹彦<sup>2</sup>, 曹言<sup>2</sup>, 陈芳慧<sup>2</sup>, 李友余<sup>1</sup>, 陈婧<sup>1</sup>, 王校怡<sup>1</sup> 苯丙氨酸和谷氨酸联合处理对大豆芽菜中5-甲基四氢叶酸富集的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904023 <b>[目的]</b>本文旨在研究苯丙氨酸与谷氨酸对大豆芽菜中5-甲基四氢叶酸(5-CH<sub>3</sub>-THF)富集的影响及其机制。<b>[方法]</b>通过单因素及全排列试验优化出苯丙氨酸与谷氨酸的最适处理浓度,采用HPLC法测定5-CH<sub>3</sub>-THF和对氨基苯甲酸(pABA)含量,采用氨基酸自动分析仪测定氨基酸组成,并通过荧光定量PCR测定叶酸合成相关基因相对表达量。<b>[结果]</b>苯丙氨酸与谷氨酸处理均显著增加大豆芽菜中5-CH<sub>3</sub>-THF含量,其含量随苯丙氨酸浓度的增加呈先升后降趋势,且苯丙氨酸浓度为3 mmol·L<sup>-1</sup>时5-CH<sub>3</sub>-THF含量最高;而当谷氨酸浓度大于0.5 mmol·L<sup>-1</sup>时,谷氨酸各浓度处理之间差异不显著。二者联合处理结果表明:3 mmol·L<sup>-1</sup>苯丙氨酸和1.0 mmol·L<sup>-1</sup>谷氨酸为最佳联合施用浓度,在此条件下,大豆芽菜中5-CH<sub>3</sub>-THF含量最高,比对照增加55.50%;pABA含量比对照增加134.49%;氨基酸代谢活跃,其中甲硫氨酸、甘氨酸及组氨酸等含量均增加;叶酸合成相关基因的相对表达量提高,羟甲基二氢蝶呤焦磷酸化-二氢喋酸合成酶(HPPK-DHPS)、二氢叶酸还原酶(DHFR)、多聚谷氨酸合成酶(FPGS)等基因的相对表达量分别为对照的4.91、5.58、3.59倍。<b>[结论]</b>苯丙氨酸与谷氨酸联合处理大豆芽菜可促进氨基酸代谢,增大叶酸的需要量,提高叶酸合成相关基因相对表达量,促进中间底物pABA的积累,从而使5-CH<sub>3</sub>-THF得以富集。 2019年07月08 00:00 2019年4期 759 766 1275930 任文芳, 王沛, 常建伟, 张钰漩, 杨润强, 顾振新 基于特征优化的稻飞虱图像分类 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904024 <b>[目的]</b>为了进一步提高稻飞虱图像分类的效率,本文提出一种基于特征优化的稻飞虱图像分类算法。<b>[方法]</b>对采集到的原始昆虫图像进行阈值分割、形态学滤波以及边缘跟踪来获取完整的昆虫彩色背部图像,同时基于该图像集提取昆虫的形态、颜色以及纹理特征66个,结合F-score特征评价方法,筛选出10个特征参数作为最优特征子集,并将其作为BP神经网络的输入特征值。<b>[结果]</b>当采用全部66个特征作为输入特征值时,稻飞虱图像的分类准确率达到96.19%;当采用最优特征子集作为输入特征值时,稻飞虱图像的分类准确率也为96.19%。<b>[结论]</b>以该方法获得的最优特征子集作为稻飞虱图像的特征参数不仅降低特征维度,提高稻飞虱图像分类效率,而且保证分类性能,为实现水稻虫害实时监测预警系统提供了技术支持。 2019年07月08 00:00 2019年4期 767 774 1741095 陆静, 王家亮, 朱赛华, 何瑞银 9种植物秸秆纤维理化性能对比研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201904025 <b>[目的]</b>本文旨在探讨9种植物秸秆(花生、油菜、芦苇、大豆、红薯、芝麻、棉花、小麦、水稻秸秆)纤维理化特性的差异,以及其替代天然植物纤维增强木塑复合材料的可行性。<b>[方法]</b>对9种秸秆纤维进行红外光谱(FTIR)和X射线(XRD)分析,并用激光共聚焦显微镜观察其表面微观结构。<b>[结果]</b>9种秸秆纤维红外光谱曲线基本相似;芦苇、油菜和棉花秸秆峰值较高,结晶度较高;芝麻和油菜秸秆抗吸湿性能高于其他7种植物秸秆材料,而小麦和水稻秸秆抗湿性差;9种秸秆纤维微观结构差异较大,芦苇、水稻和小麦秸秆长径比较大。<b>[结论]</b>在9种秸秆纤维中,芦苇和油菜秸秆具有较高的结晶度,小麦、水稻和芦苇秸秆具有较高的长径比以及较低的阻湿性,这些优异的理化特性都为秸秆纤维增强制备木塑复合材料提供了基础。 2019年07月08 00:00 2019年4期 775 780 2202184 王磊, 何春霞, 姜良朋, 李晓波