南京农业大学学报 /oa 封面 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200500 2020年09月15 00:00 2020年5期 0 0 3760408 目录 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005000 2020年09月15 00:00 2020年5期 0 0 782319 超高温好氧发酵技术:堆肥快速腐熟与污染控制机制 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005001 高温好氧发酵(堆肥化)技术是实现有机固体废物处理与资源化利用的重要手段。长期以来,发酵温度低、腐熟周期长、无害化不彻底等缺点严重制约传统堆肥工艺广泛应用。超高温堆肥(或称超高温好氧发酵)作为一种新颖的好氧发酵技术,已在工程实践中被证明能够克服传统高温堆肥的诸多缺点;该工艺利用外源添加的超高温好氧发酵菌剂,使堆体温度迅速上升至80℃以上,并能持续5~7 d,在促进堆肥快速腐熟和污染控制等方面展现出优越的技术性能。本文综述了超高温堆肥技术发展历程、核心技术特征以及在堆肥腐熟过程和二次污染控制机制等方面的最新研究进展,包括超高温堆肥快速腐殖化、氧化亚氮减排、抗生素抗性基因消减、微塑料降解、重金属钝化等多种污染物去除或控制机制等,以期为有机固体废物超高温堆肥处理与资源化利用工程实践提供科学依据。 2020年09月15 00:00 2020年5期 781 789 2008335 余震<sup>1</sup>, 周顺桂<sup>1,2</sup> <i>DAM</i>基因调控多年生果树芽休眠的机制 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005002 芽休眠是多年生果树抵御自然界不利环境,完成其生命周期的重要机制之一。芽休眠过程受到品种、光照、温度、酶、基因以及激素等因素的调控。近年来,关于芽休眠相关基因在芽休眠过程中的调控作用报道较多。其中,<i>DAM</i>(<i>Dormancy-associated MADS-box</i>)基因作为芽休眠调控核心基因备受关注。本文综合近年来国内、外研究进展,总结了多年生果树中<i>DAM</i>基因的鉴定结果,从<i>DAM</i>基因对果树芽生长的抑制作用,对<i>FT</i>类基因表达的抑制以及与植物激素之间相互调控3个方面概括了<i>DAM</i>基因调控果树芽休眠的机制,从转录因子调控、表观遗传调控、内含子区域调控、激素调控、温度调控以及光周期调控6个方面总结了影响<i>DAM</i>基因表达的因素,以期为深入研究<i>DAM</i>基因调控多年生果树芽休眠机制提供参考和借鉴。 2020年09月15 00:00 2020年5期 790 799 1154728 上官凌飞, 王子诚, 方项, 陈春, 刘天华, 陈梦霞, 房经贵 重金属汞的抗体制备及免疫分析研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005003 重金属汞免疫检测方法具有操作简单、敏感性高等优点,可作为传统仪器检测的辅助工具,用于样品中汞浓度的高通量筛查。汞的半抗原、抗体和反应信号检测体系是汞免疫分析的关键。研究人员先后基于汞-螯合剂和汞-谷胱甘肽等半抗原,制备了不同性能的汞抗体,并构建了多种汞的快速免疫检测方法。本文从抗体制备角度,重点对汞半抗原结构设计以及抗体结合特性研究进行综述,同时对基于不同信号转换的免疫分析方法研究进展进行介绍,并对其未来发展趋势进行展望。 2020年09月15 00:00 2020年5期 800 807 1289958 王玉龙<sup>1</sup>, 张存政<sup>1</sup>, 刘凤权<sup>2</sup> 基于无线传感器网络的环境噪声感知研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005004 环境噪声已经成为仅次于空气污染的第二大生态环境污染源,其持续危害人类健康、畜禽发育和农作物生长,严重阻碍生态环境的可持续发展。为获得详细噪声分布信息,世界各国陆续启动噪声地图战略计划。本文首先对我国环境噪声感知技术研究发展历程进行总结,并对研究现状进行分析。然后,从系统架构、低成本噪声传感器节点设计、噪声分类学与声源识别、能量捕获和移动噪声感知5个方面综述基于无线传感器网络的环境噪声感知国际研究发展动态。在此基础上,分析能量高效感知、轻量级多元噪声识别、无线多媒体可靠传输和噪声感知节点优化部署4个尚未解决的核心科学问题。最后,对未来研究方向进行展望。 2020年09月15 00:00 2020年5期 808 819 2014087 刘野<sup>1</sup>, 舒磊<sup>1,2</sup>, 霍志强<sup>2</sup>, 郭宣辰<sup>1</sup>, 韩光洁<sup>1</sup> 大豆E3泛素连接酶基因<i>GmPUB1</i>的克隆及功能研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005005 <b>[目的]</b> 本研究通过对大豆E3泛素连接酶基因<i>GmPUB1</i>的克隆及在拟南芥中异源表达,探究E3泛素连接酶在大豆生长发育和非生物胁迫中的作用。<b>[方法]</b> 克隆大豆E3泛素连接酶基因<i>GmPUB1</i>,并对其进行生物信息学分析。利用qRT-PCR技术分析该基因在不同组织中以及不同胁迫处理下的表达模式。通过洋葱表皮细胞瞬时表达系统对GmPUB1蛋白进行亚细胞定位分析。在拟南芥中异源表达<i>GmPUB1</i>并对其表型进行分析。<b>[结果]</b> <i>GmPUB1</i>基因(<i>Glyma.14g212200</i>)的CDS序列为1 320 bp,编码439个氨基酸且该蛋白相对分子质量和等电点分别为48.63×10<sup>3</sup>和8.35。qRT-PCR分析发现<i>GmPUB1</i>在开花后30 d的种子中表达最高。在PEG3350、NaCl、4℃及JA等非生物胁迫诱导下,<i>GmPUB1</i>均上调表达。GmPUB1蛋白在整个细胞内分布。过表达<i>GmPUB1</i>的转基因拟南芥株系的千粒质量显著提高,氨基酸含量发生改变,尤其甲硫氨酸含量显著升高,种子萌发率降低。转基因拟南芥株系具有耐盐性,但对干旱以及ABA敏感。<b>[结论]</b> <i>GmPUB1</i>基因可参与调控种子生长发育并响应逆境胁迫。 2020年09月15 00:00 2020年5期 820 828 2566278 宫宇, 毛卓卓, 史贵霞, 杨中义, 喻德跃, 黄方 基于冠层RGB图像的冬小麦氮素营养指标监测 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005006 <b>[目的]</b> 本文旨在探索基于冬小麦冠层RGB图像的氮素营养指标实时监测方法,为实现简便、准确的冬小麦氮素营养诊断和推荐施肥奠定基础。<b>[方法]</b> 基于3年次的冬小麦大田氮肥梯度试验,采用数码相机在返青期和拔节期垂直拍摄冠层RGB图像。分析图像特征参数绿红通道比值(G/R)、绿红通道差值(GMR)、红光标准化值(NRI)、绿光标准化值(NGI)、色相(H)和冠层覆盖度(CC)与植株氮素生理指标间的关系,筛选氮素营养监测指标的最优图像特征参数,构建氮素营养指标估算模型。<b>[结果]</b> CC与冬小麦地上部生物量、氮积累量和叶面积指数(LAI)三者间的相关系数最高,分别为0.87、0.85和0.84(<i>P</i>&lt;0.01);其他特征参数与三者间的相关系数相对较低,其中H为0.81、0.77和0.79,NRI为-0.80、-0.77和-0.77,G/R为0.73、0.63和0.76,GMR为0.66、0.67和0.63。采用CC作为冬小麦氮素营养指标估算模型的输入参数,并分别使用异速生长函数和指数函数建立地上部生物量、氮积累量和LAI估算模型,异速生长函数这3个指标的估算模型<i>R</i><sup>2</sup>分别为0.82、0.76和0.82(<i>P</i>&lt;0.01),指数函数的<i>R</i><sup>2</sup>分别为0.80、0.74和0.85(<i>P</i>&lt;0.01)。利用独立试验数据对模型进行验证,异速生长函数模型预测值和观测值间的<i>R</i><sup>2</sup>平均为0.89(<i>P</i>&lt;0.01),地上部生物量、氮积累量和LAI预测值的均方根误差(<i>RMSE</i>)分别为31.09 g·m<sup>-2</sup>、1.37 g·m<sup>-2</sup>和0.16;指数函数模型预测值和观测值间的<i>R</i><sup>2</sup>平均也为0.89(<i>P</i>&lt;0.01),地上部生物量、氮积累量和LAI预测值的<i>RMSE</i>分别为28.95 g·m<sup>-2</sup>、1.34 g·m<sup>-2</sup>和0.17。<b>[结论]</b> 异速生长函数和指数函数模型在利用CC对冬小麦氮素营养指标进行估算时均具有较好的预测性。基于RGB图像的监测方法操作简单、准确度高,可实时获取监测结果,具有较高的推广应用价值。 2020年09月15 00:00 2020年5期 829 837 2304931 史培华<sup>1</sup>, 王远<sup>2</sup>, 袁政奇<sup>1</sup>, 孙青云<sup>1</sup>, 蔡善亚<sup>1</sup>, 陆喜瞻<sup>1,3</sup> 不结球白菜<i>BrABF3</i>基因的克隆与功能分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005007 <b>[目的]</b> 本文旨在研究<i>BrABF3</i>基因在不结球白菜开花时间调控中的功能。<b>[方法]</b> 以不结球白菜‘苏州青’为材料,通过同源克隆获得<i>BrABF3</i>基因全长序列,再与其他物种中的同源序列进行进化树分析;利用注射法将农杆菌导入烟草叶片研究<i>BrABF3</i>基因的亚细胞定位;利用PlantCARE在线软件分析启动子motif元件;采用荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析<i>BrABF3</i>基因在早花品种‘苏州青’和晚花‘五月慢’品种不同生长期的表达情况。<b>[结果]</b> <i>BrABF3</i>基因含有1 242 bp开放阅读框,编码413个氨基酸,其蛋白定位于细胞核。在进化过程中BrABF3的氨基酸序列与甘蓝型油菜亲缘关系最近。BrABF3启动子序列中含有大量的motif元件,如光响应元件、激素响应元件和胁迫响应元件等。RT-qPCR结果表明,开花前<i>BrABF3</i>基因在晚花品种‘五月慢’中的表达显著高于早花品种‘苏州青’。<b>[结论]</b> 本试验克隆并获得<i>BrABF3</i>基因,其蛋白定位于细胞核,而且在晚花品种中高表达,推测该基因可能参与调控不结球白菜的开花时间。 2020年09月15 00:00 2020年5期 838 845 3715137 徐园园<sup>1</sup>, 李竹帛<sup>1</sup>, 王惠玉<sup>1</sup>, 李林<sup>1</sup>, 王镇<sup>2</sup>, 李英<sup>1</sup>, 侯喜林<sup>1</sup>, 刘同坤<sup>1</sup> 江苏省13个地区水稻种子携带4种不同恶苗病菌的LAMP检测 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005008 <b>[目的]</b> 水稻种子携带病原菌是水稻恶苗病的重要传播途径。本研究旨在了解当前江苏省栽培水稻品种种子携带恶苗病菌的状况。<b>[方法]</b> 采用可分别特异性识别引起水稻恶苗病的藤仓镰孢(<i>Fusarium fujikuroi</i>)、层出镰孢(<i>F.proliferatum</i>)、拟轮枝镰孢(<i>F.verticilliodes</i>)和<i>F.andiyazi</i>的LAMP检测技术,对江苏省2017年收获的103份水稻种子携带上述4种病原菌的情况进行检测。<b>[结果]</b> 在103份稻种样本中,有89份检测出携带水稻恶苗病菌。其中,检出率最高的是藤仓镰孢,为83.5%,层出镰孢、拟轮枝镰孢和<i>F.andiyazi</i>也被检测到,但检出率较低,依次为15.5%、1.9%和1.9%。<b>[结论]</b> 江苏省水稻种子携带恶苗病菌是一种普遍现象,藤仓镰孢是江苏水稻恶苗病的优势致病菌种,其次是层出镰孢。种子带菌是上述2种病原菌所致恶苗病的重要初侵染源。 2020年09月15 00:00 2020年5期 846 852 1103603 王晓莉<sup>1</sup>, 李哲<sup>1</sup>, 叶文武<sup>1</sup>, 杨红福<sup>2</sup>, 庄义庆<sup>2</sup>, 郑小波<sup>1</sup> 直接进样和柱前衍生2种方法检测水中草甘膦及其降解产物的残留 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005009 <b>[目的]</b> 本文旨在建立不衍生直接通过液相色谱质谱联用(HPLC-MS/MS)检测水中草甘膦和氨甲基膦酸的方法,并对传统柱前衍生HPLC-MS/MS检测水中草甘膦和氨甲基膦酸的方法进行优化,进而对2种方法进行系统比较。<b>[方法]</b> 直接进样法:样品过0.22 μm水系滤膜后直接进样检测,以乙腈和16 mmol·L<sup>-1</sup>氨水为流动相,HSS T3色谱柱梯度洗脱,负离子源模式,HPLC-MS/MS检测;柱前衍生法:样品经过9-芴基甲基三氯甲烷(FMOC-Cl)柱前衍生后过0.22 μm水系滤膜,以乙腈和1%甲酸+10 mmol·L<sup>-1</sup>乙酸铵为流动相,BEH C<sub>18</sub>色谱柱梯度洗脱,正离子源模式,HPLC-MS/MS检测。<b>[结果]</b> 直接进样法:草甘膦和氨甲基膦酸在0.5~200 μg·L<sup>-1</sup>线性关系良好,检出限(以3倍信噪比计)分别为0.104和0.072 μg·L<sup>-1</sup>,定量限(以10倍信噪比计)分别为0.348和0.241 μg·L<sup>-1</sup>,空白水样2种物质5个浓度水平的添加回收率为81.98%~111.24%,相对标准偏差(<i>RSD</i>)为2.18%~16.52%。柱前衍生法:草甘膦和氨甲基膦酸在0.5~200 μg·L<sup>-1</sup>线性关系良好,检出限(以3倍信噪比计)分别为0.019和0.024 μg·L<sup>-1</sup>,定量限(以10倍信噪比计)分别为0.063和0.078 μg·L<sup>-1</sup>,空白水样2种物质5个浓度水平的添加回收率为85.56%~110.32%,<i>RSD</i>为0.44%~8.44%。<b>[结论]</b> 柱前衍生法和直接进样法都能满足水中草甘膦和氨甲基膦酸的检测要求,前者具有更好的灵敏度,但是需要复杂的衍生步骤,且衍生时间需4 h以上;而直接进样法省去衍生步骤,易于操作,方便快捷。 2020年09月15 00:00 2020年5期 853 861 2480661 潘波, 姜蕾, 王冰洁, 林勇 复合性状转<i>cry2A</i><sup>*</sup>/<i>bar</i>基因水稻T2A-1的生存竞争能力 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005010 <b>[目的]</b> 本文旨在为评估复合性状转<i>cry2A</i><sup>*</sup>/<i>bar</i>基因水稻T2A-1自身杂草化的风险。<b>[方法]</b> 在农田生态环境下,以T2A-1、受体水稻‘明恢63’(MH63)、南京本地常规籼型水稻‘中莲恢510’(LC)和江苏泰州杂草稻(WRTZ)为试验材料,测定供试材料在单种或混种条件下的营养和生殖生长指标,结合落粒性和种子生存能力,评价T2A-1的生存竞争能力。<b>[结果]</b> T2A-1、MH63、LC和WRTZ出苗率为92.62%~98.35%。T2A-1与MH63的抽穗期相同,为9月12日,但晚于LC 2 d,晚于WRTZ 5 d。在单种条件下,T2A-1的相对竞争能力与MH63及LC相当,显著高于WRTZ。在混种条件下,T2A-1的相对竞争能力与MH63相当,显著高于LC和WRTZ。T2A-1的落粒率(4.17%)与MH63(3.69%)相似,两者均显著低于LC(9.50%)和WRTZ(11.29%)。T2A-1的种子生存能力与MH63相似,均显著高于LC,显著低于WRTZ。<b>[结论]</b> 在本试验条件下,T2A-1的竞争能力与受体水稻相当,但高于当地常规水稻,结合落粒性低和种子生存能力弱来综合分析,T2A-1的自身杂草化的风险较低。 2020年09月15 00:00 2020年5期 862 868 1121074 王园园, 刘琳莉, 李雷, 戴伟民, 强胜, 宋小玲 <i>Bacillus halotolerans</i> G20联合生物炭及钾长石对生菜吸收镉和改良土壤的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005011 <b>[目的]</b> 本文旨在探究细菌与不同钝化剂联合阻控生菜吸收重金属、修复重金属污染土壤的作用。<b>[方法]</b> 采集南京市某矿区镉污染土壤为盆栽试验土壤,选用生物炭(B)和钾长石(K)作为钝化剂与镉抗性细菌<i>Bacillus halotolerans</i> G20菌株联合,探究不同处理对生菜(<i>Lactuca sativa</i> L.var.<i>ramosa</i> Hort.)地上部干质量、Cd含量、营养品质和根际土壤pH值、有机质含量、Cd形态变化的影响。<b>[结果]</b> 与对照相比,菌株G20、生物炭、钾长石及其固体菌剂均能增加生菜地上部干质量,降低生菜Cd含量。其中,菌株G20与生物炭制备的固体菌剂(G20L+B)使生菜地上部Cd含量显著降低53.1%,降至0.15 mg·kg<sup>-1</sup>,低于国家食品安全生产限量标准。该固体菌剂处理还能显著提高生菜根际土壤细菌数量(16.5%)、pH值(0.3)和有机质含量(44.6%),降低根际土壤有效态Cd含量(45.4%),显著增加生菜中维生素C含量(32.9%),降低亚硝酸盐含量(38.8%),减轻Cd对生菜的毒害,提高生菜品质。<b>[结论]</b> <i>B.halotolerans</i> G20与生物炭制备的固体菌剂具有修复中度Cd污染土壤,保障蔬菜安全生产的潜力。 2020年09月15 00:00 2020年5期 869 876 1479611 殷涂童, 周倩倩, 张静, 张亚见, 盛下放, 何琳燕 不同污染强度下PAHs降解基因在土壤-根表-植物系统中的分布 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005012 <b>[目的]</b> 本文旨在解析植物-微生物联合修复多环芳烃(PAHs)污染土壤的分子机制,并为在PAHs污染区生产安全的农产品提供技术支持和理论依据。<b>[方法]</b> 以紫花苜蓿为供试植物,以菲和芘作为供试PAHs,以PAHs降解菌株<i>Sphingobium</i> sp.RS2为供试菌株,在根箱装置中进行温室盆栽试验,通过高效液相色谱技术和实时荧光定量PCR技术,研究不同PAHs污染浓度对种植紫花苜蓿的土壤-根表-植物系统中PAHs降解基因丰度和分布的影响。<b>[结果]</b> 高浓度PAHs污染对紫花苜蓿的生长有抑制作用,而接种功能菌株RS2可以促进紫花苜蓿的生长。与未接种RS2的对照组相比,接种RS2的处理组紫花苜蓿生物量平均增加约22.4%。根际土壤中PAHs残留量显著低于非根际土壤。随PAHs污染浓度增加,降解基因丰度也增加。根表部位降解基因丰度最高,各层室土壤次之,植物根部和茎叶部丰度最低;在同一采样区域中,<i>phe</i>基因丰度显著高于<i>nahAc</i>和<i>nidA</i>基因。菲、芘残留量与<i>nahAc</i>基因丰度呈显著正相关。<b>[结论]</b> 在土壤-根表-植物系统中,PAHs降解基因的丰度受PAHs浓度的影响,且根表环境中PAHs降解基因丰度最高,是PAHs代谢最为旺盛的区域。根表的PAHs代谢在去除土壤PAHs污染以及减低植物PAHs污染风险中起着不可替代的作用。 2020年09月15 00:00 2020年5期 877 886 1812877 薛佳婧, 杨洁, 宋瑶, 孙凤飞, 刘娟, 高彦征 基于熵权法综合评价植物根际促生菌对烟草的促生作用 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005013 <b>[目的]</b> 本文旨在筛选高效植物根际促生菌(PGPR),考察PGPR对烟草幼苗、成苗的促生作用,为研发烟草微生物肥料提供可靠材料。<b>[方法]</b> 以从烟草根际分离的25株功能菌为供试菌株,通过测定菌株产氰化氢(HCN)、生物固氮、溶磷、解钾、分泌吲哚乙酸(IAA)等能力,得到不同菌株的功能特性;通过烟草的各项生长指标,探究PGPR菌株对烟草的促生作用;采用熵权法对烟草生长状态的多性状进行客观评价。<b>[结果]</b> 25株PGPR菌株产HCN、生物固氮、溶磷、解钾、产IAA能力各有不同。除菌株L2外,供试PGPR均能促进烟草成苗根系和地上部生长,其中菌株PS-S和F2促生效果最好,菌株L25和VC48次之,随后是菌株W1。采用熵权法得到根系活力的权重为0.034,较其他性状大,对评价结果有更大的影响。<b>[结论]</b> 经综合评价,菌株W1、F2、VC48和LX5共4株高效PGPR菌株兼具多种功能特性,同时可以显著促进烟草生长,有望进一步研究开发成为微生物肥料生产菌种。 2020年09月15 00:00 2020年5期 887 895 1611119 马宁<sup>1</sup>, 刘艳霞<sup>2</sup>, 李想<sup>2</sup>, 陈雪<sup>3</sup>, 杨兴明<sup>1</sup> 嗜水气单胞菌Ⅵ型分泌系统假定效应蛋白基因<i>tle1</i><sup><i>AH</i></sup>的生物学功能 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005014 <b>[目的]</b> 本文旨在鉴定和研究嗜水气单胞菌中国流行株NJ-35的Ⅵ型分泌系统(T6SS)新型效应蛋白及其功能,进一步阐明其致病机制。<b>[方法]</b> 基于已报道的保守结构域DUF4123,对NJ-35株全基因组序列进行潜在的T6SS效应蛋白基因预测,采用同源重组技术构建基因缺失株和相应互补株。对野生株、缺失株和互补株分别进行细菌竞争试验,并测定细菌生长曲线、运动性、生物被膜形成能力、抗巨噬细胞吞噬能力及其对斑马鱼的半数致死量(LD<sub>50</sub>)等。<b>[结果]</b> 成功预测到假定的效应蛋白基因<i>tle1</i><sup><i>AH</i></sup>(U876-17550),并构建<i>tle1</i><sup><i>AH</i></sup>基因缺失株(Δ<i>tle1</i><sup><i>AH</i></sup>)和相应互补株(CΔ<i>tle1</i><sup><i>AH</i></sup>)。特性分析发现,与野生株比较,缺失株抑制大肠杆菌生长和抗小鼠巨噬细胞吞噬的能力明显降低,生物被膜形成能力增强,对斑马鱼的LD<sub>50</sub>增加10余倍(<i>P</i>&lt;0.01),互补株各项指标均恢复到野生株水平。<b>[结论]</b> 鉴定到嗜水气单胞菌T6SS的一个假定效应蛋白基因(<i>tle1</i><sup><i>AH</i></sup>),并对其功能进行初步研究,为进一步探讨T6SS在该菌致病过程中的作用奠定基础。 2020年09月15 00:00 2020年5期 896 902 1349761 马水燕, 王楠楠, 董雨豪, 刘锦, 陆承平, 刘永杰 氧化型辅酶NAD<sup>+</sup>及布氏杆菌SahH活性位点对SahH催化活性的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005015 <b>[目的]</b> 本文旨在鉴定影响布氏杆菌<i>S</i>-腺苷同型半胱氨酸水解酶(<i>S</i>-adenosylhomocysteine hydrolase,SahH)催化<i>S</i>-腺苷同型半胱氨酸(<i>S</i>-adenosylhomocysteine,SAH)产生同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)的催化活性位点。<b>[方法]</b> 将表达载体pET28a-<i>Bru-sahH</i>转化大肠杆菌BL21中,表达、纯化布氏杆菌SahH(Bru-SahH)蛋白,分析辅酶NAD<sup>+</sup>、磷酸化修饰及活性位点对Bru-SahH催化活性的影响。<b>[结果]</b> 添加NAD<sup>+</sup>后,Bru-SahH的催化活性降低85.6%;对Bru-SahH质谱分析表明,其444位丝氨酸为可能的磷酸化位点,对该位点突变后Bru-SahH催化SAH形成HCY的活性降低85.5%;生物信息学分析表明,Bru-SahH的337位和338位氨基酸为其活性位点,分别对上述2个位点进行单突变和双突变,突变后的Bru-SahH催化活性降低90.8%以上。<b>[结论]</b> Bru-SahH的337、338和444位氨基酸是其催化活性位点,添加外源性NAD<sup>+</sup>可抑制其催化活性。 2020年09月15 00:00 2020年5期 903 909 2256471 荆雅玮<sup>1</sup>, 左佳坤<sup>1,2</sup>, 王志豪<sup>1</sup>, 胡剑刚<sup>1</sup>, 黄燕<sup>1</sup>, 米荣升<sup>1</sup>, 苗晋锋<sup>2</sup>, PHOUTHAPANE Vanhnaseng<sup>3</sup>, 陈兆国<sup>1</sup>, 韩先干<sup>1</sup> 肾素-血管紧张素系统2条通路在油酸致大鼠BRL-3A细胞非酒精性脂肪肝中的作用 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005016 <b>[目的]</b> 通过建立油酸诱导的大鼠肝脏间质BRL-3A细胞非酒精性脂肪肝(NAFLD)损伤模型,探讨BRL-3A细胞中RAS的ACE/AngⅡ/AT1R和ACE2/Ang-1-7/Mas这2条通路相互负向调节与NAFLD细胞损伤的关系。<b>[方法]</b> 采用不同浓度油酸(0.025、0.05、0.1和0.2 mmol·L<sup>-1</sup>)处理BRL-3A细胞24 h,通过检测细胞活力、细胞内甘油三酯(TG)含量、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性以及油红染色确立NAFLD细胞模型条件,然后选取低、中、高3个浓度(0.025、0.1和0.2 mmol·L<sup>-1</sup>)油酸作用于细胞24 h,用ELISA法检测细胞上清液中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素1-7(Ang1-7)水平;Western blot分析细胞内血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素转化酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)、Mas受体(MasR)蛋白水平;斯皮尔曼相关分析法分析油酸浓度与细胞内ACE、ACE2表达水平的相关性。<b>[结果]</b> 1)用0.1 mmol·L<sup>-1</sup>油酸处理BRL-3A细胞24 h,成功建立BRL-3A细胞NAFLD模型。2)油酸处理24 h后,BRL-3A细胞出现脂滴沉积,在0.025 mmol·L<sup>-1</sup>油酸(低浓度)组,ACE2、MasR表达水平和Ang1-7水平有升高趋势,AngⅡ水平与AT1R表达水平下降,ACE/ACE2值下降;0.1 mmol·L<sup>-1</sup>油酸(中浓度)组ACE、AT1R表达水平显著升高,其他RAS成员变化不明显;0.2 mmol·L<sup>-1</sup>油酸(高浓度)组,ACE2、MasR表达水平和Ang1-7水平下降,AngⅡ水平和ACE、AT1R表达水平及ACE/ACE2值升高。3)斯皮尔曼相关分析显示,油酸浓度、血液相关生化指标(TG含量、AST和ALT活性)和脂滴数及脂滴面积与ACE2表达水平和Ang1-7水平负相关,而与ACE表达水平和AngⅡ水平正相关。<b>[结论]</b> BRL-3A细胞中的2条轴共同参与了油酸致BRL-3A细胞NAFLD损伤的发生和发展过程。低浓度油酸时,ACE2介导的Ang1-7/MasR通路占优势;高浓度油酸处理细胞损伤加重,ACE介导的AngⅡ/AT1R通路占主导地位。ACE2与油酸致细胞炎性损伤的程度呈显著负相关关系。 2020年09月15 00:00 2020年5期 910 918 1638851 王换换, 刘颖, 李帅, 何晟, 朱斌, 张源淑 6种常用抗寄生虫药在鸡的生物药剂学分类研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005017 <b>[目的]</b> 本研究拟建立基于靶动物生理参数的禽用药物溶解度和渗透性测定方法,并依据生物药剂学分类系统(Biopharmaceutics Classification System,BCS)对6种兽医临床常用抗寄生虫药(吡喹酮、阿苯达唑、盐酸左旋咪唑、盐酸氨丙啉、地克珠利、常山酮)进行分类。<b>[方法]</b> 1日龄AA内鸡90只饲养至8周龄,分别于1、4和8周龄时测定鸡体温、胃肠液体积和胃肠pH值,通过计算剂量数(<i>D</i><sub>o</sub>)确定6种药物的生理溶解度及分类;以酒石酸美托洛尔为高低渗透性参考标准,结合单层细胞模型和鸡小肠原位灌流试验测定的药物表观渗透系数(<i>P</i><sub>app</sub>)和有效渗透系数(<i>P</i><sub>eff</sub>),确定药物的渗透性并进行分类。<b>[结果]</b> 将鸡常用药物溶解度的测定条件规定为41℃及pH1~8的水性缓冲溶液,高溶解度的定义为药物单次给药的最高剂量能完全溶解于21 mL(进食)或7 mL(禁食)的水性缓冲溶液中。<i>D</i><sub>o</sub>计算结果表明盐酸左旋咪唑、盐酸氨丙啉和常山酮在鸡进食及禁食条件下均为高溶解度药物,吡喹酮、阿苯达唑和地克珠利则为低溶解度药物。单层细胞模型法测得吡喹酮、阿苯达唑和盐酸左旋咪唑的<i>P</i><sub>app</sub>分别为12.92×10<sup>-6</sup>、15.12×10<sup>-6</sup>和14.64×10<sup>-6</sup> cm·s<sup>-1</sup>,均高于酒石酸美托洛尔(6.58×10<sup>-6</sup> cm·s<sup>-1</sup>),故为高渗透性药物。鸡小肠原位灌流试验结果表明,6种药物在鸡体内的<i>P</i><sub>eff</sub>分别为0.76×10<sup>-4</sup>、1.35×10<sup>-4</sup>、0.93×10<sup>-4</sup>、0.05×10<sup>-4</sup>、0.66×10<sup>-4</sup>和0.31×10<sup>-4</sup> cm·s<sup>-1</sup>,其中吡喹酮、阿苯达唑和盐酸左旋咪唑的<i>P</i><sub>eff</sub>均高于酒石酸美托洛尔(0.68×10<sup>-4</sup> cm·s<sup>-1</sup>),为高渗透性药物,与单层细胞模型法测定的结果相一致。综合6种药物的溶解度和渗透性测定结果,确定6种药物的BCS分类为:盐酸左旋咪唑为Ⅰ类药物;吡喹酮和阿苯达唑为Ⅱ类药物;盐酸氨丙啉和常山酮为Ⅲ类药物;地克珠利为Ⅳ类药物。<b>[结论]</b> 初步确定了鸡常用药物生理溶解度测定条件以及渗透性测定方法,完成了6种常用抗寄生虫药在鸡的BCS分类,为鸡常用药物BCS框架的建立奠定了基础。 2020年09月15 00:00 2020年5期 919 926 992275 李香秀<sup>1</sup>, 王玥<sup>1</sup>, 孙乃岩<sup>1</sup>, 刘洋<sup>1</sup>, 黄金虎<sup>1</sup>, 樊萍<sup>2</sup>, 王丽平<sup>1</sup> 马度米星铵对鲫鱼肝脏细胞色素P450酶系的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005018 <b>[目的]</b> 本文旨在研究鲫鱼肝脏细胞色素P450酶系对马度米星铵的响应。<b>[方法]</b> 采用半静态染毒法,分别设置0.112、0.224和0.448 mg·L<sup>-1</sup>马度米星铵处理组和助溶剂对照组,在染毒后7、14、21和28 d,测定肝脏中细胞色素P450 1A(<i>CYP1A</i>)、3A(<i>CYP3A</i>)及4T(<i>CYP4T</i>)基因mRNA表达水平,同时测定7-乙氧基异吩唑酮-脱乙基酶(EROD)、氨基比林-<i>N</i>-脱甲基酶(APND)、苯胺-4-羟化酶(AH)、红霉素-<i>N</i>-脱甲基酶(ERND)、NADPH-细胞色素C还原酶(NCCR)的活性及细胞色素P450(CYP450)的含量;通过体外肝微粒体孵育法评价马度米星铵对CYP1A活性的影响。<b>[结果]</b> 马度米星铵对<i>CYP1A、CYP3A</i>和<i>CYP4T</i> mRNA表达水平有一定诱导作用;0.448 mg·L<sup>-1</sup>马度米星铵组CYP450含量在染毒后14 d显著低于对照组(<i>P</i>&lt;0.05);0.224和0.448 mg·L<sup>-1</sup>马度米星铵组APND和NCCR活性在染毒后14 d显著低于对照组(<i>P</i>&lt;0.05);0.224和0.448 mg·L<sup>-1</sup>马度米星铵组EROD活性在染毒后14和21 d显著低于对照组(<i>P</i>&lt;0.05);试验期间,马度米星铵组ERND活性均低于对照组;各染毒组的AH活性呈先升高后降低的趋势;体外肝微粒体孵育体系中,马度米星铵对CYP1A活性的抑制作用小于25%。<b>[结论]</b> 马度米星铵对鲫鱼肝微粒体CYP1A活性无影响;马度米星铵对ERND活性的抑制作用可能与<i>CYP3A</i>的转录水平无关;ERND对马度米星铵较为敏感,适合作为马度米星铵污染水体的生物标志物。 2020年09月15 00:00 2020年5期 927 934 1290836 杨丹, 宋昕昊, 季春雷, 彭麟, 高修歌, 左儒楠, 季辉, 江善祥 牛磺酸对肉鸡肉品质、糖酵解潜力及肌纤维特性的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005019 <b>[目的]</b> 本文旨在研究日粮添加牛磺酸对肉鸡肉品质、糖酵解潜力(GP)及肌纤维特性的影响。<b>[方法]</b> 选取72只体质量相近的28日龄雄性爱拔益加肉鸡,随机分为2组,每组6个重复,每个重复6只鸡。对照组饲喂基础日粮,处理组在基础日粮中添加0.5%牛磺酸,饲养期为14 d。饲养试验结束后采集腿肌样品用于指标分析。<b>[结果]</b> 与对照组相比,牛磺酸组肉鸡腿肌pH<sub>45 min</sub>值显著提高(<i>P</i>&lt;0.05),pH<sub>24 h</sub>值极显著提高(<i>P</i>&lt;0.01),蒸煮损失显著降低(<i>P</i>&lt;0.05),剪切力极显著降低(<i>P</i>&lt;0.01);乳酸含量显著降低(<i>P</i>&lt;0.05),GP极显著降低(<i>P</i>&lt;0.01);牛磺酸的添加极显著降低腿肌肌纤维直径,增加肌纤维密度(<i>P</i>&lt;0.01),显著增加Ⅰ型肌纤维比例(<i>P</i>&lt;0.05),降低Ⅱb型肌纤维比例(<i>P</i>&lt;0.05);牛磺酸的添加显著提高了肉鸡腿肌中钙调磷酸酶(<i>CaN</i>)、活化T细胞核转录因子(<i>NFATc1</i>)、过氧化物酶体增殖物激活受体C辅激活因子1α(<i>PGC1α</i>)和肌细胞增强因子2C(<i>MEF2C</i>)mRNA的相对表达量(<i>P</i>&lt;0.05)。<b>[结论]</b> 日粮中添加牛磺酸可通过CaN-NFAT信号通路,促进肉鸡腿肌肌纤维由Ⅱb型向Ⅰ型转化,降低GP,进而改善肉品质。 2020年09月15 00:00 2020年5期 935 941 1490360 徐苏微, 邢通, 李蛟龙, 张林, 高峰 竹醋液对夏季蛋鸡产蛋性能、蛋品质及粪便氨气含量的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005020 <b>[目的]</b> 本文旨在研究日粮和饮水中添加竹醋液(bamboo vinegar,BV)对夏季蛋鸡产蛋性能、蛋品质、血清生理指标和粪便中氨气含量的影响。<b>[方法]</b> 将150只36周龄体质量相近的海兰褐壳蛋鸡随机分为5组,其中对照组(BV<sub>0</sub>)饲喂基础日粮;BV<sub>0.1</sub>、BV<sub>0.5</sub>和BV<sub>1</sub>组分别在基础日粮中加入1、5和10 mL·kg<sup>-1</sup>饲料级竹醋液,同时在饮用水中加入1 mL·L<sup>-1</sup>饮用级竹醋液;HAc<sub>1</sub>组在基础日粮中加入10 mL·kg<sup>-1</sup>乙酸溶液。每组3个重复,每重复10只蛋鸡,试验持续60 d。<b>[结果]</b> 与对照组相比,饲喂竹醋液60 d,各竹醋液组的平均产蛋率显著增加(<i>P</i>&lt;0.05);各竹醋液组和HAc<sub>1</sub>组的蛋黄颜色均有所加深,其中HAc<sub>1</sub>组较为显著(<i>P</i>&lt;0.05);各竹醋液组鸡蛋中的总胆固醇含量有下降趋势(<i>P</i>&gt;0.05),蛋白质含量则略有上升(<i>P</i>&gt;0.05);各竹醋液组和HAc<sub>1</sub>组蛋鸡血清中丙二醛含量极显著下降(<i>P</i>&lt;0.01),BV<sub>0.5</sub>组血清中尿酸含量显著降低(<i>P</i>&lt;0.05);各竹醋液组鸡粪氨气产生量有所减少(<i>P</i>&gt;0.05)。<b>[结论]</b> 蛋鸡日粮和饮水中添加竹醋液可提高产蛋性能,改善蛋品质,提高机体抗氧化能力,并减少鸡粪中氨气含量;在本试验条件下,分别在日粮中添加5 mL·kg<sup>-1</sup>饲料级竹醋液和在饮水中添加1 mL·L<sup>-1</sup>饮用级竹醋液效果最好。 2020年09月15 00:00 2020年5期 942 949 1332581 闫孟鹤<sup>1</sup>, 郗蒙雪<sup>1</sup>, 崔宇<sup>2</sup>, 李春梅<sup>1</sup> 消费者喜好度与市售冷鲜鸡品质关系的偏最小二乘回归分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005021 <b>[目的]</b> 本文旨在研究消费者喜好度与市售冷鲜鸡品质的关联性规律。<b>[方法]</b> 对储藏1~7 d的冷鲜鸡进行消费者喜好度评价,应用本项目建立的专业感官评价培训体系对感官评价小组进行专业化训练、样品感官评价以及微生物、理化指标测定。<b>[结果]</b> 根据感官评价及微生物、理化指标的聚类分析结果,储藏1~7 d的冷鲜鸡被分为3个等级:储藏1~2 d的冷鲜鸡为A等级,3~4 d的冷鲜鸡为B等级,5~7 d的冷鲜鸡为C等级。根据消费者喜好度评价,消费者对A等级冷鲜鸡的购买意愿显著高于C等级,但低于B等级。将储藏1~7 d冷鲜鸡消费者喜好度、微生物指标分别与感官品质相关的机械测定指标进行偏最小二乘回归变量投影重要性(VIP)分析,结果表明对消费者喜好度有显著影响的指标重要性从大到小依次为回复性、黏附性、<i>b</i><sup>*</sup>值、硬度(<i>VIP</i>&gt;1);有比较显著影响的指标重要性从大到小依次为离心损失、<i>a</i><sup>*</sup>值、剪切力、弹性、<i>L</i><sup>*</sup>值、咀嚼性(0.5 &lt; <i>VIP</i> &lt; 1)。与微生物指标有显著关联性的指标重要性从大到小依次为黏附性、回复性、离心损失、<i>a</i><sup>*</sup>值(<i>VIP</i>&gt;1);与微生物指标关联性较强的指标重要性从大到小依次为<i>b</i><sup>*</sup>值、咀嚼性、硬度、<i>L</i><sup>*</sup>值、弹性、剪切力(0.5 &lt; <i>VIP</i> &lt; 1)。<b>[结论]</b> 消费者喜好度与市售冷鲜鸡品质存在不完全一致性,与冷鲜鸡消费者喜好度、微生物指标相关的机械测定指标重要性顺序存在不完全一致性。 2020年09月15 00:00 2020年5期 950 958 1431797 赵天娇, 王鹏, 徐幸莲 猪胴体不同冷链运输条件下微生物变化 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005022 <b>[目的]</b> 本文旨在研究冷藏车不同距离(200、300、400、500 km)运输过程中车厢温、湿度,猪胴体温度,猪胴体表面菌落总数变化及群落演替规律。<b>[方法]</b> 在冷藏车车厢内部固定GPRS远程温、湿度实时记录仪,监测并记录运输途中车厢温、湿度变化。在猪胴体后腿肉部位插入并固定插入式中心温度记录仪,实时检测并记录运输途中猪胴体中心温度变化。采用菌落计数方法研究猪胴体流通过程中菌落总数变化。采用16S rRNA测序方法研究流通过程中猪胴体表面微生物群落演替。<b>[结果]</b> 除500 km组外,各组冷藏车温度都低于12℃,运输过程温度波动较小,呈平稳恒定或缓慢下降趋势。菌落总数与运输距离密切相关,200 km组菌落总数最低,超过200 km后,300、400、500 km 3组菌落总数均有显著增加。随着运输距离的增加,菌落总数增加,不同部位间菌落总数差异逐渐缩小,直至各部位菌落总数无显著差异。16S rRNA测序结果显示:工厂起点微生物群落丰度较高,经运输、分割等操作后各组群落丰度减少,且各组均出现丰度不同的腐败菌,如不动杆菌属、假单胞菌属、肠杆菌属、索丝菌属和莫拉氏菌属等。<b>[结论]</b> 猪胴体流通链末端微生物污染较严重,尤其是从物流中心到销售终端,人为操作引入了假单胞菌污染,故冷链末端需加强低温控制,避免因温度控制不到位使腐败菌爆发性增长导致猪肉腐败变质。 2020年09月15 00:00 2020年5期 959 968 3419733 李润雪, 李春保, 贾晓楠, 许芊芊, 吴菊清 基于机器视觉的断奶仔猪腹泻自动识别方法 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202005023 <b>[目的]</b> 断奶仔猪腹泻严重影响养猪业的经济效益,本试验基于机器视觉技术提出一种排泄姿态与异常粪便结合的断奶仔猪腹泻检测方法以实现断奶仔猪腹泻的快速、准确检测。<b>[方法]</b> 以深层卷积神经网络(convolutional neural networks,CNN)为基础构建腹泻检测分类模型,实现仔猪身份、姿态与异常粪便的一体化识别,对比不同迭代次数对模型效果的影响,选取最优模型;提出时空信息融合判定法,从时间序列先后和空间距离远近两方面,关联最优模型识别出的目标姿态与病便,实现断奶仔猪腹泻的视频检测。<b>[结果]</b> 在训练迭代25 000次时接近模型最优值,对姿态、病便等目标识别的平均精度均值和召回率分别为95.75%和89.13%;基于时空信息融合方法的断奶仔猪腹泻视频检测识别准确率和召回率分别为97.92%和95.92%。<b>[结论]</b> 深层卷积神经网络分类模型结合时空信息融合判定法为断奶仔猪腹泻自动识别提供了有力的技术支撑。 2020年09月15 00:00 2020年5期 969 978 3428252 丁静<sup>1</sup>, 沈明霞<sup>2</sup>, 刘龙申<sup>2</sup>, 孙玉文<sup>1</sup>, 陆明洲<sup>2</sup>, 姚文<sup>3</sup>, 张海林<sup>1</sup>