南京农业大学学报 /oa 封面 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180300 2018年05月15 00:00 2018年3期 0 0 3022053 目录 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803000 2018年05月15 00:00 2018年3期 0 0 761418 多酚与淀粉样纤维相互作用新说 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803001 先前的研究均发现,多酚类小分子能够抑制低浓度的蛋白质淀粉样纤维的形成,或者是切断、改造淀粉样纤维。我们首次发现,在高浓度淀粉样纤维条件下,多酚类小分子化合物能够通过疏水作用、π-π共轭作用、氢键作用吸附到球蛋白淀粉样纤维的表面,驱动处于液晶态的纳米纤维超分子自组装,在空间形成饱含水分的三维立体网状多层次结构,即水凝胶。并且,这种相互作用不依赖于对蛋白质的特殊选择性。这种水凝胶中的淀粉样纤维通过自身的物理结构特性(电位、疏水性、构象等),诱导食源性致病菌凝聚,进而破坏其细胞结构,实现广谱的抗菌作用。同时,对正常人体细胞没有影响,所以安全可靠。 2018年05月15 00:00 2018年3期 389 391 1216383 胡冰, 林丽 氢气植物学效应的研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803002 氢气(hydrogen,H<sub>2</sub>)是一种新的气体信号分子。藻类和微生物的氢酶可以产生并释放H<sub>2</sub>,高等植物也可能存在类似于氢酶的蛋白催化H<sub>2</sub>的合成。同时,各种非生物胁迫和激素也可诱导产生H<sub>2</sub>。与动物中H<sub>2</sub>通过选择性抗氧化预防和辅助治疗多种疾病所不同的是,植物中H<sub>2</sub>的生理作用可能还与其通过迅速诱导活性氧信号,从而调动抗氧化防护系统有关。H<sub>2</sub>具有多种植物学效应,包括调控生长发育和提高对生物胁迫和非生物胁迫的抗/耐性,其分子机制涉及对miRNA、基因表达、激素水平和蛋白质修饰的调控,并可能与一氧化氮(nitric oxide,NO)和一氧化碳(carbon monoxide,CO)等气体信号转导有关。H<sub>2</sub>的研究掀起了新一轮健康革命,"氢农业"的发展也已初具规模。本文主要综述了H<sub>2</sub>产生、生理功能以及与激素等信号分子互作的研究进展,并对H<sub>2</sub>植物学效应和"氢农业"进行了展望。 2018年05月15 00:00 2018年3期 392 401 1599999 沈文飚<sup>1</sup>, 苏久厂<sup>1</sup>, 孙学军<sup>2</sup> 施硫时期对小麦颖果和胚乳发育的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803003 <b>[目的]</b>本文旨在探究施硫时期对小麦颖果和胚乳发育的影响。<b>[方法]</b>以‘扬麦16’为材料,研究了播种期、拔节期、孕穗期、开花期各施60 kg·hm<sup>-2</sup>硫肥对小麦颖果发育形态、胚乳中蛋白和淀粉分布与积累的影响,以不施硫肥为对照。<b>[结果]</b>施硫使小麦灌浆中后期颖果长度、宽度、周长、投影面积和干、鲜质量增加,发育后期颖果投影面积增加了0.5%~18.7%;在孕穗期施硫显著增加胚乳细胞数,相对增加量为92%~97%。胚乳中蛋白体总面积因施硫而增加,而小淀粉粒总面积则降低。施用硫肥提高了籽粒各层蛋白质含量,主要调控皮层和外胚乳中淀粉含量。各施硫时期对籽粒蛋白质和淀粉分布及含量的影响从大到小依次为孕穗期、播种期、开花期、拔节期。<b>[结论]</b>施硫提高胚乳细胞数,增大籽粒库容;提高了灌浆中期蛋白体的比例,有利于成熟籽粒蛋白质的积累,并以孕穗期施硫处理调控效果最好。 2018年05月15 00:00 2018年3期 402 412 8168884 陶莉敏, 周琴, 蔡剑, 王笑, 戴廷波, 姜东 基于图像增强和<i>α</i>角度模型的<i>K</i>均值小麦冠层分割算法的改进 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803004 <b>[目的]</b>本文旨在克服光照不均引起的低对比度、反光、阴影、光斑及遮挡等对大田复杂背景下小麦冠层图像分割的干扰。<b>[方法]</b>设计了一种结合脉冲耦合神经网络(pulse coupled neural network,PCNN)与同态滤波的自适应图像增强和基于<i>L</i><sup>*</sup><i>a</i><sup>*</sup><i>b</i><sup>*</sup>颜色空间<i>α</i>角度模型的<i>K</i>均值聚类分割算法。首先,将小麦冠层图像转换到HSI颜色空间,采用自适应算法对HSI空间的I分量进行增强处理,适当调节饱和度<i>S</i>分量,补偿光照强度分布不均,去除阴影及拉大对比度;其次,将增强处理后的图像映射到<i>L</i><sup>*</sup><i>a</i><sup>*</sup><i>b</i><sup>*</sup>颜色空间,提取<i>a</i><sup>*</sup>、<i>b</i><sup>*</sup>分量建立<i>α</i>角度模型;最后,基于<i>α</i>进行<i>K</i>均值聚类分割处理。<b>[结果]</b>拔节前后光照强度不一、光照不均的冬小麦冠层图像的分割试验结果表明,该算法可一定程度避免基于<i>L</i><sup>*</sup><i>a</i><sup>*</sup><i>b</i><sup>*</sup>颜色空间<i>α</i>角度分量<i>K</i>均值聚类的过分割现象;改善基于HSI空间<i>H分量K</i>均值聚类的欠分割缺陷,且对光斑、阴影遮挡、反光突出的图像分割更完整准确。<b>[结论]</b>本算法可为大田复杂背景下光照多变的作物冠层图像分割提供参考方法。 2018年05月15 00:00 2018年3期 413 421 4481197 张小虎<sup>1</sup>, 黄芬<sup>1,2</sup>, 陈佳悦<sup>2,3</sup>, 高翔<sup>2</sup>, 刘铭<sup>2</sup>, 姚霞<sup>1</sup>, 朱艳<sup>1</sup> 6种不结球白菜材料叶片抗氧化活性的比较及花青苷合成相关基因的表达分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803005 <b>[目的]</b>本文旨在比较不结球白菜不同材料间叶片总花青苷含量及其抗氧化活性,探究花青苷合成相关基因的表达特性。<b>[方法]</b>以6种不结球白菜材料为试材,采用DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)法和铁离子还原能力(FRAP)法检测了叶片提取液抗氧化活性,并测定了花青苷合成相关结构基因(<i>BrcF3H、BrcDFR、BrcANS、BrcCHI、BrcCHS、BrcUFGT</i>)和调节基因(<i>BrcTT8、BrcTTG1、BrcMYB75、BrcMYB90、BrcGL3、BrcEGL3.1、BrcEGL3.2</i>)的表达水平。<b>[结果]</b>在6种不结球白菜材料中,深紫色材料NJZX1-4的总花青苷含量最高,为(801.5±57.4)μg·g<sup>-1</sup>。6种材料叶片提取液的DPPH自由基清除率为(49.31±3.91)%~(84.94±6.20)%,铁离子还原能力为(256.8±136.3)~(1 279.5±202.0)μg·g<sup>-1</sup>,其中紫色材料NJZX1-1叶片的DPPH自由基清除率和铁离子还原能力最强,且总花青苷含量与DPPH自由基清除率和铁离子还原能力均存在极显著正相关。结构基因<i>BrcF3H、BrcDFR、BrcANS</i>和调节基因<i>BrcTT8</i>在6种材料中的表达量与总花青苷的含量呈正相关。调节基因<i>BrcMYB75</i>和<i>BrcTTG1</i>在紫色材料NJZX1-4叶片中具有较高的表达量,而<i>BrcEGL3.2</i>和<i>BrcMYB90</i>基因在所有材料中均无表达。<b>[结论]</b>不结球白菜不同材料间花青苷含量和抗氧化活性存在显著差异,且紫色材料富含的花青苷在高抗氧化性方面发挥了重要作用。此外,3个结构基因和3个调节基因的表达水平与总花青苷含量密切相关,在调控不结球白菜叶片着色过程中起重要作用。 2018年05月15 00:00 2018年3期 422 428 1831559 董慧杰, 韩克, 侯喜林, 张志硕, 胡春梅 葡萄SBP-box转录因子家族的生物信息学分析及其应答激素调控葡萄果实成熟的作用 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803006 <b>[目的]</b>本文旨在分析已知葡萄(<i>Vitis vinifera</i> L.)SBP-box家族基因基本信息,研究其在葡萄果实发育成熟过程中的调控作用。<b>[方法]</b>利用葡萄转录因子PlantTF数据库(http://planttfdb.cbi.pku.edu.cn/index.php?sp=Vvi)查询并获得<i>SBP-box</i>基因,采用ClustalX 2、DNAMAN 6、Web Logo 3、MEGA 4.1和Gene Structure Display Server等软件对其基因与蛋白序列进行生物信息学分析。利用Plantcare软件分析葡萄转录因子SBP-box家族成员的启动子元件,预测其与果实发育及成熟过程相关的潜在作用。采用RT-qPCR技术研究<i>VvSBP</i>基因在果实发育成熟过程中的作用。<b>[结果]</b>从转录因子数据库中共得到19个葡萄<i>SBP-box</i>基因。SBP-box结构域分析显示,多达61个位点氨基酸具有较高的保守性。进化树分析结果显示,葡萄<i>SBP-box</i>基因共分为3个亚组。染色体定位分析显示,<i>VvSBP</i>基因在1号染色体上分布最多(4个),其次是染色体5、15、4、7、8、10、11、12、14、17、18和19,染色体2、3、6、9、13和16则没有分布。启动子作用元件分析表明,SBP-box家族所有成员的启动子均含有与果实发育和成熟相关的作用元件。结合RT-qPCR结果,发现约9个成员可能促进了葡萄果实的成熟过程,且大部分成员属于第1亚组和第3亚组;约7个成员可能促进了葡萄果实的生长发育,但抑制了果实的转色与成熟过程,且大部分成员属于第2亚组。<b>[结论]</b>葡萄<i>SBP-box</i>基因结构高度保守,多数成员参与调控果实发育与成熟过程。 2018年05月15 00:00 2018年3期 429 439 4338006 崔梦杰<sup>1</sup>, 王晨<sup>1</sup>, 冷翔鹏<sup>1</sup>, 吴伟民<sup>2</sup>, 汤崴<sup>1</sup>, 张文颖<sup>1</sup>, 朱旭东<sup>1</sup>, 贾海锋<sup>1</sup>, 沈文飚<sup>3</sup>, 房经贵<sup>1</sup> 切花小菊主要分枝性状的混合遗传分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803007 <b>[目的]</b>本文旨在解析切花小菊一、二级分枝性状的变异情况和主基因遗传效应。<b>[方法]</b>以切花小菊‘南农雪峰’בMonalisa’F<sub>1</sub>代为试验材料,调查了F<sub>1</sub>分离群体的总侧芽数、中上部一级分枝数、一级分枝长度、一级分枝角度、二级分枝总数、二级分枝长度、二级分枝角度在2015年和2016年的表型变异,利用F<sub>2</sub>群体主基因+多基因混合遗传模型方法分析了这7个分枝性状。<b>[结果]</b>7个分枝性状均呈连续分布,变异系数为12.89%~61.55%;各分枝性状均存在正向或负向的中亲优势和超亲分离个体,其中总侧芽数、中上部一级分枝数、一级分枝角度和二级分枝总数的中亲优势较大,中亲优势率分别为-9.69%、-9.10%、12.99%和25.51%。混合遗传分析表明,总侧芽数、二级分枝长度、一级分枝角度和二级分枝角度符合0MG模型,无主基因控制;中上部一级分枝数和二级分枝总数符合2MG-AD模型,由2对加-显性主基因控制;一级分枝长度符合1MG-AD遗传模型,由1对加性-显性主基因控制。中上部一级分枝数、一级分枝长度、二级分枝总数的主基因遗传率分别为74%、46%、72%。<b>[结论]</b>初步明确了切花小菊主要分枝性状的遗传变异和主基因遗传效应,对今后切花小菊的株型育种具有重要参考价值。 2018年05月15 00:00 2018年3期 440 446 2093156 杨信程, 苏江硕, 吴洋洋, 张飞, 管志勇, 陈发棣, 房伟民 枯草芽胞杆菌T-500产脂肽类抗生素的摇瓶发酵工艺优化 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803008 <b>[目的]</b>枯草芽胞杆菌(<i>Bacillus subtilis</i>)T-500是1株对水稻纹枯病和稻瘟病均有良好防治效果的生防菌,通过优化其摇瓶发酵工艺,从而提高发酵液中脂肽类抗生素的含量,为T-500菌株生防制剂的开发提供技术支撑。<b>[方法]</b>以水稻纹枯病菌(<i>Rhizoctonia solani</i>)为指示菌,利用酸沉淀法提取T-500菌株发酵液中的脂肽类抗生素,并进行脂肽抗生素粗提液的抑菌效果分析,筛选影响抑菌效果的发酵培养基主成分;随后通过Plackett-Burman试验设计、中心组合试验设计和响应曲面法,优化T-500菌株高产脂肽类抗生素的发酵培养基成分和发酵条件。<b>[结果]</b>T-500菌株高产脂肽类抗生素的最佳培养基为:黄豆饼粉7.00 g·L<sup>-1</sup>,蛋白胨4.92 g·L<sup>-1</sup>,酵母粉1.90 g·L<sup>-1</sup>,小麦粉5.00 g·L<sup>-1</sup>,玉米糊5.00 g·L<sup>-1</sup>,NaCl 1.00 g·L<sup>-1</sup>,MgSO<sub>4</sub> 0.20 g·L<sup>-1</sup>,MnSO<sub>4</sub> 5.0 mg·L<sup>-1</sup>,FeSO<sub>4</sub> 0.5 mg·L<sup>-1</sup>。最佳发酵培养条件为:装液量500 mL三角瓶装105 mL,接种量0.87%,发酵时间41.35 h,温度28℃,转速180 r·min<sup>-1</sup>。利用最佳摇瓶发酵工艺,T-500菌株所产生的脂肽类抗生素对纹枯病菌的抑菌带最宽,达(11.23±0.15)mm,菌含量达(7.41±1.18)×10<sup>9</sup>CFU·mL<sup>-1</sup>。经摇瓶发酵试验和抑菌活性验证,理论预测值与实际值无显著差异。质谱和色谱检测表明:优化发酵工艺后产生的Surfactin含量较基础培养基提高了48.2%,Iturin含量较基础培养基提高了180.9%;优化发酵工艺后检测到了Fengycin的产生,但优化前未发现Fengycin的产生。<b>[结论]</b>利用响应曲面法成功优化了枯草芽胞杆菌T-500产脂肽类抗生素的摇瓶发酵工艺;优化后,T-500产脂肽类抗生素产量增加,抑菌活性增强。 2018年05月15 00:00 2018年3期 447 455 2583771 乔俊卿, 刘邮洲, 张荣胜, 刘永锋 施用氨基酸有机肥对黄瓜产量及土壤生物学性状的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803009 <b>[目的]</b>养殖场病死畜禽的无害化、资源化处理是减少环境污染、保障养殖业良性发展而亟需解决的关键问题之一。高温酸解病死畜禽制成的氨基酸液与普通有机肥复配制成氨基酸有机肥是实现病死畜禽无害化、资源化利用的重要途径之一。本研究旨在评估氨基酸有机肥对黄瓜产量及土壤生物学性质的影响。<b>[方法]</b>采用实时荧光定量PCR等技术手段,研究连续施用氨基酸有机肥对设施黄瓜产量、土壤理化性质、氮素循环微生物数量及土壤酶活性的影响。<b>[结果]</b>田间试验结果表明:与不施肥对照相比,氨基酸有机肥处理、单施化肥、施用鸡粪有机肥处理黄瓜分别增产48.2%、29.5%和30.6%。与不施肥对照相比,氨基酸有机肥处理能显著提高土壤pH值和铵态氮、硝态氮、有效磷的含量,而与其他施肥处理间差异较小。氨基酸有机肥处理土壤的氨氧化细菌数量显著高于不施肥对照,但显著低于其他施肥处理;反硝化<i>nirK</i>基因数量显著高于不施肥对照,而显著低于施用鸡粪有机肥处理;<i>nirS</i>基因数量显著高于不施肥对照及单施化肥处理。氨基酸有机肥处理土壤的过氧化氢酶及磷酸酶活性显著高于其他施肥处理和不施肥对照;脲酶活性显著高于不施肥对照但低于其他施肥处理;蔗糖酶活性显著高于不施肥对照且与其他施肥处理无显著差异。<b>[结论]</b>施用氨基酸有机肥可改善土壤理化性质,增强土壤生物肥力,提高根系可吸收利用的速效养分及游离氨基酸含量,增加黄瓜产量。 2018年05月15 00:00 2018年3期 456 464 1245312 吕娜娜<sup>1</sup>, 沈宗专<sup>1</sup>, 王东升<sup>1,2</sup>, 刘红军<sup>1</sup>, 薛超<sup>1</sup>, 李荣<sup>1</sup>, 沈其荣<sup>1</sup> 不同梨砧木幼苗钾营养效率的差异 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803010 <b>[目的]</b>探讨不同钾水平下4种梨砧木幼苗钾营养特性的差异,为培育钾高效梨砧木提供优异种质和理论依据。<b>[方法]</b>以‘山梨’、‘杜梨Ⅰ’(湖北杜梨)、‘杜梨Ⅱ’(郑州杜梨)和‘豆梨’幼苗为供试材料,采用适钾(3.0 mmol·L<sup>-1</sup>)和低钾(0.1 mmol·L<sup>-1</sup>)2个营养液培养方法,研究钾素对梨不同砧木幼苗生长,钾、钙、镁含量,钾素分配和利用效率的影响。<b>[结果]</b>低钾处理下,各个品种梨砧木幼苗的根、茎、叶及全株干质量均低于适钾处理,其中‘山梨’的下降幅度最小;‘山梨’的根总长和根尖数在低钾处理下均升高,但其他品种的根系参数都有不同程度的下降。低钾处理导致梨砧木幼苗体内钾浓度及钾积累量降低,钙、镁含量升高,且与其他品种相比,‘山梨’的升高幅度最大。在不同钾水平处理下,各个品种梨砧木幼苗各器官的钾分配比例从大到小的器官分别为叶、根、茎;与其他品种叶片相比,‘山梨’叶片中的钾分配比例最高。低钾处理显著提高了各个品种梨砧木幼苗的钾利用效率,‘山梨’的增加幅度最大,其钾效率比及钾利用效率均高于其他品种。此外,‘山梨’幼苗的叶绿素含量均显著高于其他品种钾处理;在低钾处理下,‘山梨’幼苗根和叶中丙二醛含量的增加量均较低。<b>[结论]</b>在低钾胁迫下,‘山梨’幼苗具有较有利的生理特性和更高效的钾素利用能力,适应低钾胁迫。 2018年05月15 00:00 2018年3期 465 472 1492514 彭莉润, 谢昶琰, 刘慧冉, 石晓倩, 徐阳春, 董彩霞 生长素参与三十烷醇诱导的拟南芥侧根发育 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803011 <b>[目的]</b>本文旨在研究植物生长调节剂三十烷醇对拟南芥侧根发育的影响,揭示其调控侧根发育的机制,为生产上的使用提供理论依据。<b>[方法]</b>以野生型拟南芥、生长素不敏感型突变体为试验材料,外源三十烷醇处理生长5 d的幼苗,分析侧根数目、侧根密度、侧根原基数量、侧根原基密度、细胞周期调控的关键基因的表达、根部内源吲哚乙酸(indole-3-acetic acid,IAA)含量、生长素合成关键基因表达等指标。<b>[结果]</b>外源三十烷醇处理拟南芥的幼苗,能够诱导侧根的产生,0.20、0.50和1.00 μmol·L<sup>-1</sup>三十烷醇处理8 d,侧根密度分别增加了59.0%、97.9%和54.2%;0.5 μmol·L<sup>-1</sup>三十烷醇处理后阶段A的侧根(此时包含3层细胞)原基密度增加了67.8%。外源三十烷醇处理增加根部IAA的含量,上调参与生长素合成的关键酶基因表达,增强根尖和不同发育阶段侧根生长素响应报告基因<i>DR5∶β-glucuronidase</i>(<i>GUS</i>)和<i>IAA2∶GUS</i>的表达。生长素运输抑制剂三碘苯甲酸(2,3,5-triiodobenzoic acid,TIBA)及萘基邻氨甲酰苯甲酸(1-naphthylphthalamic acid,NPA)和作用抑制剂<i>p</i>-chlorophenoxy isobutyric acid(PCIB)的添加抑制了三十烷醇诱导的侧根发育;生长素不敏感型突变体<i>tir1-1</i>和<i>axr1-3</i>对三十烷醇缺乏响应,而<i>aux1-7</i>和<i>eir1-1</i>对三十烷醇的响应弱于野生型。<b>[结论]</b>三十烷醇能够通过促进侧根原基的从头形成来增加侧根的密度,其诱导侧根发育依赖生长素的途径。 2018年05月15 00:00 2018年3期 473 480 1916144 李芳芳, 杨娜, 钱猛, 甘立军 ASAP1调节巨噬细胞对结核分枝杆菌吞噬作用的研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803012 <b>[目的]</b>结核病是全球最重要的人畜共患传染病之一,Arf核糖激化因子GTP酶活化蛋白(ASAP1)与结核病易感性相关。本文旨在明确在细胞水平ASAP1表达与结核分枝杆菌感染的关系,探究ASAP1是否参与巨噬细胞对<i>Mycobacterium tuberculosis</i>(<i>Mtb</i>)的吞噬以及了解该蛋白表达对巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌的影响。<b>[方法]</b>以人源单核细胞建立的不同ASAP1表达水平的巨噬细胞作为模型,通过感染结核分枝杆菌开展了一系列体外试验,使用BCG和<i>Mtb</i> H37Ra菌株感染THP-1分化的巨噬细胞,Western blot以及荧光定量PCR检测感染后<i>ASAP1</i>的表达;建立不同ASAP1表达水平的巨噬细胞,进一步研究ASAP1对巨噬细胞吞噬<i>Mtb</i> H37Ra的调节作用;利用<i>Mtb</i> H37Ra感染不同表达ASAP1的巨噬细胞,通过细菌菌落计数及细胞免疫荧光试验,检测ASAP1表达水平与巨噬细胞吞噬<i>Mtb</i> H37Ra的关系。<b>[结果]</b><i>Mtb</i> H37Ra感染诱导ASAP1表达上调,BCG感染不能诱导ASAP1表达上调,说明ASAP1参与了巨噬细胞对<i>Mtb</i> H37Ra的吞噬作用;利用<i>Mtb</i> H37Ra感染不同ASAP1表达水平的巨噬细胞,证实ASAP1低水平表达的巨噬细胞对<i>Mtb</i> H37Ra吞噬能力减弱,高水平表达的巨噬细胞对<i>Mtb</i> H37Ra的吞噬能力增强,ASAP1表达水平与巨噬细胞对<i>Mtb</i> H37Ra的吞噬能力呈正相关。<b>[结论]</b><i>Mtb</i>感染能诱导ASAP1高水平表达,ASAP1参与巨噬细胞对<i>Mtb</i>吞噬,并通过该蛋白表达对巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌进行调控,ASAP1的超高水平表达可诱导巨噬细胞对<i>Mtb</i>过多地吞噬。 2018年05月15 00:00 2018年3期 481 488 1620724 李鹏, 崔佳, 王丽清, 吴长新 荚膜聚合酶Wzy对猪链球菌Chz型致病力的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803013 <b>[目的]</b>本文旨在研究荚膜聚合酶Wzy对猪链球菌Chz型致病力的影响。<b>[方法]</b>通过基因组可视化软件(ACT)和比较基因组学方法,探究猪链球菌荚膜(CPS)基因簇的遗传多样性;构建<i>cpsB</i>及<i>wzy</i>基因缺失株,利用透射电子显微镜(TEM)研究Wzy与荚膜合成的关系;采用细胞试验及动物试验等验证荚膜聚合酶Wzy对细菌致病力的影响。<b>[结果]</b>与野生株相比,<i>wzy</i>基因缺失株荚膜样物质减少并展现出更强的生物被膜形成能力。细胞试验显示,缺失株具有更强的小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)黏附能力和侵袭能力,但对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)的吞噬作用更敏感。BALB/c小鼠攻毒试验结果表明,缺失株的致病力显著减弱,在小鼠体内的定殖和扩散能力也明显下降。<b>[结论]</b>荚膜聚合酶Wzy降低猪链球菌的致病力。 2018年05月15 00:00 2018年3期 489 495 2985239 逯朋朋, 张越, 钟孝俊, 姚火春 鸡球虫共同抗原UCE免疫原性分析及其对多种球虫感染的免疫保护效果评估 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803014 <b>[目的]</b>在前期研究中,筛选到了存在于多种鸡球虫间的共同抗原泛素缀合酶结构域蛋白(UCE),本研究进一步分析其免疫原性,评估其对多种球虫感染的免疫保护效果。<b>[方法]</b>提取纯化的堆型艾美耳球虫孢子化卵囊总RNA,用反转录PCR(RT-PCR)技术扩增堆型艾美耳球虫<i>UCE</i>基因(<i>EaUCE</i>),插入pVAX1质粒,构建真核表达质粒pVAX-<i>EaUCE</i>,通过RT-PCR和Western blot检测pVAX-<i>EaUCE</i>在鸡体内的转录和表达情况。经流式细胞术和间接ELISA法检测pVAX-<i>EaUCE</i>免疫后鸡体细胞免疫和体液免疫水平变化,分析其免疫原性。分别采用柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫及三者的混合卵囊人工感染雏鸡,观察感染前、后雏鸡体质量变化和排出卵囊减少量,评估其对多种球虫感染的免疫保护效果。<b>[结果]</b><i>EaUCE</i>基因开放阅读框为444 bp,编码148个氨基酸,BLAST分析显示,柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫UCE氨基酸序列同源性均大于95%。pVAX-<i>EaUCE</i>能够在鸡体内成功转录和表达。pVAX-<i>EaUCE</i>免疫后,鸡体的CD<sub>4</sub><sup>+</sup>/CD<sub>3</sub><sup>+</sup>和CD<sub>8</sub><sup>+</sup>/CD<sub>3</sub><sup>+</sup>细胞比例显著升高,<i>IFN-γ、IL-2、IL-4、TNFSF15、IL-17D、TGF-β4</i> mRNA和IgY抗体水平显著升高,表明免疫该质粒能诱导细胞和体液产生免疫反应(<i>P</i>&lt;0.05)。pVAX-<i>EaUCE</i>免疫后,与对照组相比,免疫组鸡体质量显著增加,卵囊产量明显下降,肠道损伤也相应减轻。<b>[结论]</b>鸡球虫共同抗原UCE具有良好的免疫原性,可对多种球虫感染提供部分免疫保护力,有望成为抵抗多种球虫感染的候选抗原。 2018年05月15 00:00 2018年3期 496 503 1378880 刘剑华<sup>1</sup>, 刘连瑞<sup>1</sup>, 李灵娟<sup>2</sup>, 徐立新<sup>1</sup>, 严若峰<sup>1</sup>, 李祥瑞<sup>1</sup>, 宋小凯<sup>1</sup> 植物乳杆菌制剂对断奶仔猪肠道黏膜功能和微生物菌群及短链脂肪酸的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803015 <b>[目的]</b>本试验旨在研究植物乳杆菌制剂对苏淮断奶仔猪肠道黏膜营养素转运体、紧密连接蛋白相关基因表达量、微生物菌群数量、短链脂肪酸及乳酸含量的影响。<b>[方法]</b>选取胎次和体质量(9.34 kg)相近的28日龄健康苏淮断奶仔猪144头,按饲喂日粮随机分为对照组(基础日粮)、抗生素组(基础日粮+抗生素)、植物乳杆菌制剂组(基础日粮+植物乳杆菌制剂),每组6个重复,每个重复8头仔猪。预饲期3 d,仔猪32日龄开始试验,59日龄试验结束时屠宰采样。采集十二指肠、空肠、回肠组织及黏膜样品分别用于黏膜营养素转运体和紧密连接蛋白相关基因表达量分析;分别收集盲肠和结肠食糜,测定短链脂肪酸和乳酸含量,RT-qPCR分析微生物菌群数量。<b>[结果]</b>与对照组相比,植物乳杆菌制剂组可显著上调十二指肠<i>PepT1</i>、空肠<i>SGLT-1</i>和<i>PepT1</i>以及回肠<i>SGLT-1</i>基因的相对表达量(<i>P</i>&lt;0.05),与抗生素组相比,植物乳杆菌对各基因的相对表达量均无显著影响(<i>P</i>&gt;0.05);与对照组和抗生素组相比,植物乳杆菌制剂组可显著上调十二指肠<i>Occludin</i>、空肠和回肠<i>Occludin</i>和<i>ZO-1</i>基因的相对表达量(<i>P</i>&lt;0.05),而对十二指肠、空肠、回肠其他基因无明显影响(<i>P</i>&gt;0.05);与对照组相比,植物乳杆菌制剂组可显著增加盲肠丁酸、结肠丁酸和乳酸的含量(<i>P</i>&lt;0.05),而对乙酸和丙酸无显著影响(<i>P</i>&gt;0.05);显著减少大肠杆菌数量(<i>P</i>&lt;0.05),显著增加结肠乳酸杆菌和梭菌ⅩⅣa群的数量(<i>P</i>&lt;0.05);相较于抗生素组,植物乳杆菌制剂可显著提高盲肠乳酸、结肠乳酸和丁酸含量以及盲肠和结肠中乳酸杆菌的数量(<i>P</i>&lt;0.05)。<b>[结论]</b>仔猪断奶时饲喂植物乳杆菌制剂可调节肠道黏膜营养素转运体及紧密连接蛋白相关基因表达量,提高短链脂肪酸和乳酸含量,促进肠道有益菌如乳酸杆菌、梭菌ⅩⅣa群的增殖,减少病原菌如大肠杆菌数量,从而促进肠道健康,缓解断奶应激。 2018年05月15 00:00 2018年3期 504 510 944775 李雪莉, 虞徳夫, 王超, 丁立人, 朱伟云, 杭苏琴 凹凸棒石黏土对饲料颗粒质量及樱桃谷肉鸭生长性能、屠宰性能、肌肉品质和抗氧化性能的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803016 <b>[目的]</b>本试验旨在研究日粮中添加不同水平的凹凸棒石黏土(凹土)对饲料颗粒质量及樱桃谷肉鸭生长性能、屠宰性能、肌肉品质和抗氧化性能的影响。<b>[方法]</b>按照随机区组试验设计,将720只1日龄的樱桃谷肉鸭随机分为4个处理组,每组6个重复,每个重复30只。分别饲喂基础日粮(对照组)及添加5、10和20 g·kg<sup>-1</sup>凹土的试验日粮。试验期42 d,1~14 d为前期,15~42 d为后期。试验结束时,每重复随机抽取1只公鸭屠宰,用于各项指标测定。<b>[结果]</b>与对照组相比,添加3种不同水平凹土均显著提高肉鸭前期饲料颗粒硬度以及降低前期饲料的含粉率(<i>P</i>&lt;0.05),添加20 g·kg<sup>-1</sup>凹土使后期饲料的颗粒硬度显著提高(<i>P</i>&lt;0.05),但其他凹土添加水平对后期饲料的颗粒硬度及含粉率无显著影响(<i>P</i>&gt;0.05)。与对照组相比,添加3种不同水平的凹土对樱桃谷肉鸭的终末体质量、平均日采食量、平均日增重和料重比均无显著影响。与对照组相比,日粮中添加10 g·kg<sup>-1</sup>凹土显著提高胸肌率、腿肌率与瘦肉率,添加20 g·kg<sup>-1</sup>凹土显著提高腿肌率与瘦肉率,但对胸肌率没有影响(<i>P</i>&gt;0.05),其中,就腿肌率而言,10 g·kg<sup>-1</sup>凹土添加水平较20 g·kg<sup>-1</sup>凹土添加水平提高显著。与对照组相比,添加3种水平凹土均显著降低胸肌的滴水损失,添加20 g·kg<sup>-1</sup>凹土显著降低胸肌的蒸煮损失,添加10 g·kg<sup>-1</sup>凹土显著降低胸肌的红度值(<i>a</i><sup>*</sup>)和腿肌的滴水损失。与对照组相比,日粮中添加10和20 g·kg<sup>-1</sup>凹土均显著提高胸肌的超氧化物歧化酶(SOD)活性,添加5 g·kg<sup>-1</sup>凹土显著提高胸肌的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;添加10 g·kg<sup>-1</sup>凹土显著提高腿肌SOD活性,添加3种水平凹土均显著降低腿肌中丙二醛(MDA)含量。<b>[结论]</b>在本试验条件下,基础日粮中添加凹土能改善饲料颗粒质量,提高樱桃谷肉鸭的屠宰性能,改善肌肉品质,提高肌肉的抗氧化能力,对肉鸭的生长性能无显著不利影响,其最佳添加水平为10 g·kg<sup>-1</sup>。 2018年05月15 00:00 2018年3期 511 518 952366 王雨雨, 刘强, 王保哲, 范程瑞, 黎佳颖, 庄苏 Hippo信号通道中<i>Lats2</i>基因表达与湖羊肌肉生长发育的关系 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803017 <b>[目的]</b>探究Hippo信号通道中<i>Lats2</i>基因与湖羊肌肉生长发育的关联性。<b>[方法]</b>以湖羊作为试验材料,用RT-qPCR技术分析<i>Lats2</i>基因在不同性别、不同生长阶段(2、60、180日龄)、不同肌肉组织(比目鱼肌、背最长肌、腓肠肌和趾长伸肌)的时空表达规律,及其与<i>Lats1、YAP1</i>(Yes相关蛋白1)基因和肌肉生长相关基因在不同生长阶段的相关性。<b>[结果]</b>根据Hippo信号通道中<i>Lats2</i>基因的时空表达规律可以发现:在不同肌肉组织中,<i>Lats2</i>基因在趾长伸肌中相对表达量最高;在不同生长阶段,<i>Lats2</i>基因在60日龄的表达量最高;在不同性别中,<i>Lats2</i>基因的表达表现为公羊高于母羊。相关性分析结果表明:在2日龄肌肉组织中,<i>Lats2</i>基因的表达与<i>MSTN</i>基因间正相关(<i>P</i>&lt;0.05);在60日龄的肌肉组织中,<i>Lats2</i>基因的表达与<i>Lats1</i>基因正相关(<i>P</i>&lt;0.05);在180日龄肌肉组织中,<i>Lats2</i>基因的表达与<i>MyoG</i>基因间极显著正相关(<i>P</i>&lt;0.01),与<i>YAP</i>1基因间显著负相关(<i>P</i>&lt;0.05)。<b>[结论]</b>Hippo信号通道中<i>Lats2</i>基因的表达受不同性别、年龄和肌肉组织的影响,可能通过下调<i>YAP</i>1基因的表达抑制肌肉生长发育,可作为肌肉生长发育调控研究的候选基因。 2018年05月15 00:00 2018年3期 519 525 1120993 王利宏<sup>1</sup>, 王庆增<sup>1</sup>, 鲍建军<sup>1</sup>, 于嘉瑞<sup>1</sup>, 陈玲<sup>2</sup>, 方明<sup>3</sup>, 袁文龙<sup>4</sup>, 孙伟<sup>1</sup> 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对仔猪海马神经细胞凋亡及线粒体膜电位的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803018 <b>[目的]</b>本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对仔猪海马神经细胞的凋亡及其信号通路的影响。<b>[方法]</b>体外培养仔猪海马神经细胞至对数生长期,以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng·mL<sup>-1</sup>)进行处理,采用倒置显微镜和透射电镜观察细胞的形态学变化及线粒体结构,CCK-8试剂盒检测细胞的存活率,流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化,ELISA试剂盒检测caspase-3酶活性,荧光定量PCR(RT-qPCR)检测<i>Bcl-2</i>和<i>Bax</i> mRNA的表达水平。<b>[结果]</b>DON可显著抑制仔猪海马神经细胞存活率并诱导细胞发生明显的形态学变化,且具有剂量和时间效应;DON可降低线粒体膜电位,增强caspase-3酶活力,并通过上调<i>Bax</i> mRNA和下调<i>Bcl-2</i> mRNA的表达,增加<i>Bax/Bcl-2</i>值。<b>[结论]</b>DON可通过引起线粒体功能障碍,激活caspases-3并调节<i>Bcl-2</i>家族基因,从而诱导仔猪海马神经细胞凋亡。 2018年05月15 00:00 2018年3期 526 533 2771932 陈晓芳, 张娅菲, 储小燕, 姜云晶, 朱电锋, 范梦雪, 冯士彬, 李玉, 吴金节, 王希春 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对蛋鸡生产性能、血液指标和抗氧化能力的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803019 <b>[目的]</b>本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对高产蛋鸡生产性能、蛋品质、血常规、血液生化指标以及肝脏抗氧化能力的影响。<b>[方法]</b>选用26周龄体质量为(1.90±0.2)kg、产蛋率一致的海兰蛋鸡120只,随机分为6组,每组4个重复,每个重复5只,对照组每天灌胃等量生理盐水,试验组每天分别灌胃1、5、10、20和50 mg·kg<sup>-1</sup> DON,连续灌服6周。<b>[结果]</b>与对照组相比,不同质量浓度DON处理组蛋白高度和哈夫单位均显著升高,白细胞(WBC)和血小板(PLT)数量均显著降低(<i>P</i>&lt;0.05或<i>P</i>&lt;0.01)。DON剂量为10 mg·kg<sup>-1</sup>时,与对照组相比,蛋鸡产蛋率极显著降低(<i>P</i>&lt;0.01),血清中红细胞(RBC)数量、血红蛋白(HGB)含量和红细胞压积(HCT)极显著上升至最高(<i>P</i>&lt;0.01);DON剂量高于10 mg·kg<sup>-1</sup>时,与对照组相比,血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)活性和尿素(UREA)浓度及肝脏组织中一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)浓度显著提高(<i>P</i>&lt;0.05或<i>P</i>&lt;0.01),蛋壳颜色和肝脏组织中总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著降低(<i>P</i>&lt;0.05或<i>P</i>&lt;0.01),但5 mg·kg<sup>-1</sup> DON组的T-AOC水平和SOD活性显著提升(<i>P</i>&lt;0.05)。<b>[结论]</b>DON会显著影响蛋鸡的凝血功能,当DON剂量达到10 mg·kg<sup>-1</sup>会显著降低蛋鸡产蛋率和蛋品质,引起肝脏和肾脏组织损伤,对肝脏的抗氧化能力也具有显著抑制作用。 2018年05月15 00:00 2018年3期 534 541 961622 郭晋丽<sup>1,2,3</sup>, 赵志辉<sup>2</sup>, 郭文博<sup>2</sup>, 孙真真<sup>2</sup>, 杨俊花<sup>2</sup>, 张德福<sup>1,3</sup> <sup>60</sup>Co-γ辐照对猪血清白蛋白免疫原性及构象的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803020 <b>[目的]</b>本文旨在研究<sup>60</sup>Co-γ辐照对猪血清白蛋白(PSA)免疫原性和蛋白构象的影响。<b>[方法]</b>应用表面等离子共振(SPR)技术、圆二色(CD)光谱、紫外光谱和荧光光谱方法,研究在(10±0.5)℃条件下,1、3、5、7和10 kGy辐照剂量处理对过敏原猪血清白蛋白免疫原性及蛋白构象的影响,并分析过敏原免疫原性与其蛋白质构象的相关性。<b>[结果]</b>过敏原PSA在辐照剂量低于3 kGy时其免疫原性略有降低,之后随着辐照剂量的增加而显著降低(<i>P</i>&lt;0.05)。辐照对过敏原PSA构象的影响则采用CD光谱、紫外光谱和荧光光谱来进行表征。过敏原PSA经辐照处理后其α-螺旋含量明显降低,二级结构发生改变;过敏原猪血清白蛋白的紫外吸收值随着辐照剂量的增加呈上升趋势;而过敏原猪血清白蛋白的荧光光谱强度随着辐照剂量的增加而降低,其最大发射峰还发生蓝移现象。<b>[结论]</b><sup>60</sup>Co-γ辐照处理可以通过改变过敏原猪血清白蛋白的蛋白质构象来达到降低其抗原性的目的。 2018年05月15 00:00 2018年3期 542 546 1543223 王玮, 朱旭东, 梁丽姣, 舒蕊华, 范巧君 不同单硬脂酸甘油酯含量的大豆油油凝胶性能和微观结构分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803021 <b>[目的]</b>本文旨在研究不同含量单硬脂酸甘油酯与大豆油形成的油凝胶的性能。<b>[方法]</b>试验所用单硬脂酸甘油酯含量分别为3%、5%、7%、9%、12%和15%(质量分数),通过测定油凝胶的临界成胶含量、硬度、持油性、流变性、热性能、化学键的相互作用以及双折射现象对油凝胶的三维网络结构和凝胶机制进行研究。<b>[结果]</b>单硬脂酸甘油酯在大豆油中的临界成胶含量为7%。随着单硬脂酸甘油酯含量增加,油凝胶的硬度和持油性提高,单硬脂酸甘油酯含量为15%时的凝胶强度和持油性分别高达(1.03±0.09)N和99.84%;表观黏度、复合模量增大,仍为触变性流体;凝胶强度和配位数增大。热分析表明:凝胶因子有固态的亚阿尔法相与反向层状相、反向层状相与液态的各向同性相间的转变,由于过冷现象,融解峰总是在结晶峰的右侧;凝胶因子的含量对油凝胶的相转变温度没有显著影响,由于大豆油的稀释效应,纯的单硬脂酸甘油酯的相转变温度要比油凝胶的高。傅里叶变换红外光谱分析表明:单硬脂酸甘油酯形成的分子间氢键是维持油凝胶三维网络结构的主要作用力。偏振光显微镜分析表明凝胶因子含量越高,三维网络结构越致密、双折射现象越明显。<b>[结论]</b>改变单硬脂酸甘油酯的含量可以调整油凝胶的性能和微观结构。 2018年05月15 00:00 2018年3期 547 554 2182442 刘盼盼, 许苗苗, 祁文静, 陆兆新, 吕凤霞, 别小妹, 张充, 赵海珍 基于电子鼻技术的草莓损伤检测系统的开发 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803022 <b>[目的]</b>本文旨在研发一款用于草莓损伤检测的专用电子鼻系统。<b>[方法]</b>该系统主要包含软、硬件两大部分,其中硬件部分包含由6个金属氧化物传感器(MOS)构成的传感器阵列、密闭气室、采集电路及洗气净化装置;软件部分则分为数据采集模块和数据分析及模式判别模块。以‘红颜’草莓品种为研究对象,静态提取草莓果实的顶部空气,传感器接触敏感气体分子产生电信号,经模数转换成数值输送至电脑(PC)端后,由数据分析及模式判别模块对试验数据进行预处理、特征提取及模式识别,最终根据所建模型获得判别结果,从而实现对损伤果实的正确识别。<b>[结果]</b>该系统实现了电子鼻小型化、便携式的设计。传感器均对草莓的挥发性气味有不同的响应信号,且损伤草莓与完好草莓的挥发性气味存在差异,表现出不同的"指纹图谱"。利用支持向量机(SVM)方法对损伤草莓进行建模,验证试验表明,该模型具有较好的适用性,其判别准确率为92.5%。<b>[结论]</b>研发的电子鼻系统简易、便携,所建立的草莓损伤检测模型具有较高的识别率,对损伤草莓的区分具有可行性,同时也为草莓损伤的检测提供了一种小型化无损检测装置。 2018年05月15 00:00 2018年3期 555 561 2402202 邢梦珂, 孙柯, 赵楠, 潘磊庆, 屠康 基于单幅图像的玉米果穗数量性状测量方法 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803023 <b>[目的]</b>玉米果穗数量性状是玉米考种和产量预测的重要参数,主要包括穗行数、行粒数和总粒数。快速精确地测量果穗数量性状是玉米自动化考种的难点问题。<b>[方法]</b>选用干玉米果穗进行试验,以单幅果穗图像为研究对象,在改进YCrCb色彩空间的基础上利用双峰法提取果穗轮廓,将图像沿穗轴等分为20部分,对每部分采用像素累计法得到穗行的定位点,对定位点线性插值得到穗行线,通过分析穗行线上的像素变化得到行粒数,利用果穗横截面的几何模型估算穗行数,并采用补偿法校正单幅果穗图像的成像误差以提高其计算精度,最后将行粒数与行数相乘得到总粒数。<b>[结果]</b>该方法对光照环境和图像背景要求较低,能适应较强的背景反光与阴影;避免对穗粒进行图像分割,使穗行线与行间隙定位的可靠性和准确性提高;校正单幅果穗图像的成像误差,使穗行数估算结果的准确性提高。统计结果显示:定位穗行线的失误率在6%以下,穗行数、行粒数和总籽粒数平均计算精度分别为98.84%、96.33%和95.67%,其中穗行数估算的零误差率为90.91%,平均测量速度达到每穗1.936 s。<b>[结论]</b>该方法能快速而精确地测量玉米果穗数量性状。 2018年05月15 00:00 2018年3期 562 569 3894702 高启, 李毅念, 金典, 龚成杰, 范亮亮, 李刘阳洋 温度、水分和掺假对蜂蜜黏度的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201803024 <b>[目的]</b>为丰富和深化蜂蜜黏度研究,对掺假蜜和掺水蜜进行了流变学试验,以研究温度、水分、掺假3因素对蜂蜜黏度的影响。<b>[方法]</b>对54个掺假蜜和12个掺水蜜进行了8个不同温度下的流变学试验。对试验结果进行了线性拟合和指数衰减拟合、<i>t</i>测验和<i>F</i>测验统计分析,得出了真、假蜜黏度变化的经验公式。<b>[结果]</b>真、假蜂蜜样本黏度-温度关系都符合Arrhenius公式,蜂蜜样本的黏度-温度、黏度-水分和黏度随温度和水分变化规律均符合指数衰减规律。<b>[结论]</b>Arrhenius公式中的常数与原蜜样本和掺假度有关,但不随掺假度单调变化。水分活化能和温度活化能,两者可分别定量揭示水分和温度对黏度的影响。 2018年05月15 00:00 2018年3期 570 576 1834974 陈桂云, 吴威, 陈坤杰