南京农业大学学报 /oa 封面 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180100 2018年01月15 00:00 2018年1期 0 0 751737 目录 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801000 2018年01月15 00:00 2018年1期 0 0 759656 诱饵模式——病原菌致病的全新机制 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801001 XEG1属于GH12家族糖基水解酶,能降解植物细胞壁,是疫病菌攻击植物的关键"武器"。植物在利用抑制蛋白GIP1对XEG1的防卫过程中,疫霉菌能分泌失去酶活性的XEG1突变体——XLP1作为"诱饵"吸引抑制蛋白,掩护XEG1对植物的攻击。 2018年01月15 00:00 2018年1期 1 2 1020246 王源超 植物染色体诱变研究与应用进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801002 植物染色体工程是通过人工诱致染色体变异进行植物改良的技术。染色体变异在外源基因转移和利用、染色体倍性操作、反向育种等方面发挥着重要作用,促进了染色体基因组学、物理作图和染色体生物学研究。基因组学、分子标记和染色体鉴定技术的发展进一步促进了化学、物理和遗传诱变的深入研究和应用,不断创造和鉴定出更多具有不同用途的染色体变异,为植物改良和遗传研究提供了新工具。本文综述了植物染色体诱变研究与应用进展,并对存在的问题和发展趋势进行了讨论,为有效开展染色体工程提供参考。 2018年01月15 00:00 2018年1期 3 17 2008433 庄丽芳, 亓增军 卵菌胞内效应子研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801003 卵菌可引起毁灭性的植物病害,在侵染过程中分泌大量的胞内效应子进入植物细胞干扰寄主免疫反应。目前主要针对CRN(crinkling and necrosis protein)和RXLR(R:精氨酸;X:任意氨基酸;L:亮氨酸)两类胞内效应子进行了大量研究。近年来对这两类卵菌胞内效应子的研究进展迅速,极大地推动了我们对卵菌致病机制的认识。本文将从卵菌胞内效应子的进化、转运、功能和作用机制等方面对近年来的进展进行综述,并对今后的研究方向进行展望。 2018年01月15 00:00 2018年1期 18 25 978457 张美祥 果蔬光学参数测量及其在品质检测方面的研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801004 光子在果蔬组织内部的传输规律可以由吸收系数、散射系数等光学参数来表征。果蔬光学参数与果蔬组织内部的化学成分、组织结构密切相关,是分析果蔬品质的一类重要指标。果蔬光学参数的测量为了解光子在果蔬组织的传输规律,以及开发新型的果蔬品质光学无损检测方法提供了途径。为了追踪这项技术在果蔬方面的最新研究进展,本文对时间分辨、空间分辨、频域分辨和积分球技术这4种光学参数测量技术的原理和特点进行简单介绍,并着重介绍了2001—2017年期间,其在果蔬组织光学参数的测量及品质检测方面的应用进展,旨在为果蔬光学参数测量技术的研究和应用提供参考。 2018年01月15 00:00 2018年1期 26 37 1554460 潘磊庆<sup>1</sup>, 魏康丽<sup>1</sup>, 曹念念<sup>1</sup>, 孙柯<sup>1</sup>, 刘强<sup>1</sup>, 屠康<sup>1</sup>, 朱启兵<sup>2</sup> 水稻晚开花突变体<i>lft1</i>的鉴定与基因克隆 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801005 <b>[目的]</b>通过对水稻晚开花突变体<i>lft1</i>(late flowering time)的鉴定及基因定位,解析水稻响应光周期调控开花的分子机制。<b>[方法]</b>从‘日本晴’T-DNA插入突变体库中筛选得到一个在长日照下晚开花的突变体<i>lft1</i>。调查了<i>lft1</i>/日本晴F<sub>2</sub>分离群体的开花期表型,分析晚开花表型与T-DNA插入之间的相关性。比较日本晴/9311 F<sub>2</sub>群体和<i>lft1</i>/9311 F<sub>2</sub>群体的开花期分布,选取群体中具有突变效应的极端晚开花单株进行基因定位。比较突变体<i>lft1</i>和野生型‘日本晴’中已知开花期基因的表达水平,分析基因在调控网络中的作用。<b>[结果]</b>相比于野生型‘日本晴’,突变体<i>lft1</i>在长日照条件下晚开花20 d,粒长和千粒质量均显著增加。对<i>lft1</i>/日本晴F<sub>2</sub>群体调查发现,晚开花性状由1对隐性基因控制,且与T-DNA插入呈现非共分离。相比于对照日本晴/9311 F<sub>2</sub>群体,在<i>lft1</i>/9311 F<sub>2</sub>群体中出现了极端晚开花的个体,从中选取了58株极端个体用于基因的初定位。利用‘日本晴’和‘9311’之间的多态性分子标记对极端晚开花个体进行了图位克隆,将基因限定在第9染色体短臂上,分子标记RM219与RM3912之间,物理距离为2.94 Mb的范围内。在开发标记的过程中,发现分子标记SJ9-32能够在‘日本晴’和‘9311’中实现扩增,但是在<i>lft1</i>及其后代的极端个体中均不能有效扩增。通过进一步设计标记,我们最终验证了在<i>lft1</i>中存在DNA片段的缺失,该缺失区段覆盖了<i>SDG724</i>基因。等位性测验进一步证实<i>lft1</i>的晚开花表型是由于<i>SDG724</i>基因的缺失而引起的。qRT-PCR结果表明,<i>SDG724</i>可以调节<i>OsMADS51</i>和<i>RFT1</i>的表达水平。<b>[结论]</b>突变体<i>lft1</i>中由于<i>SDG724</i>基因的缺失,导致<i>OsMADS51</i>和<i>RFT1</i>的表达水平下调,从而引起晚开花性状。通过调控<i>SDG724</i>基因的表达水平来调节水稻开花期,这在生产上将具有重要意义。 2018年01月15 00:00 2018年1期 38 48 3330151 许乐峰<sup>1</sup>, 许昕阳<sup>1</sup>, 张欢<sup>1</sup>, 赵志刚<sup>1</sup>, 郑天慧<sup>1</sup>, 赵婕妤<sup>1</sup>, 曾召琼<sup>1</sup>, 刘喜<sup>1</sup>, 陈赛华<sup>1</sup>, 万建民<sup>2</sup> 不结球白菜花青苷合成负调控基因<i>BrcLBD39</i>的克隆和表达分析及其对外源6-BA的响应 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801006 <b>[目的]</b>本文旨在探究<i>LBD39</i>基因在不结球白菜紫色和绿色材料中的特性及其对外源6-BA的响应,为花青苷调控机制奠定理论基础。<b>[方法]</b>以不结球白菜紫色自交系NJZX1-3及其绿色突变体NJZX1-0为材料,同源克隆<i>LBD39</i>基因的全长,应用生物信息学方法分析其核酸和蛋白序列及其进化关系,并在线预测蛋白质二级和三级结构。采用外源6-BA处理后测定叶片中花青苷含量,并通过实时荧光定量PCR技术测定了<i>LBD39</i>基因在外源6-BA处理后的表达水平。<b>[结果]</b>在2个不同材料中克隆获得的<i>LBD39</i>基因完全相同,序列长为876 bp,包含编码区(长为699 bp)及非编码区(长为177 bp)。其编码区序列含有1个长为696 bp的开放阅读框(ORF),编码232个氨基酸,将该基因命名为<i>BrcLBD39</i>。亚细胞定位预测该蛋白分布在细胞核中,蛋白相对分子质量为25.30×10<sup>3</sup>,等电点为8.85。进化树分析表明,BrcLBD39蛋白序列与大白菜BraLBD39相似性为100%,其次与油菜和甘蓝关系最近,相似性分别为99%和93%。外源6-BA处理24 h以后紫色材料NJZX1-3叶片中花青苷含量均高于对照,而绿色突变体叶片基本不含花青苷;<i>BrcLBD39</i>基因在2个材料中具有相似的表达模式,即先下降后上升而后又下降,其中在处理后48 h时<i>BrcLBD39</i>基因表达量急剧增加,在紫色和绿色材料中增量分别为74.84%和49.87%。此外,<i>BrcLBD39</i>表达量在绿色材料中明显高于紫色材料。<b>[结论]</b>不结球白菜中花青苷负调控基因<i>BrcLBD39</i>既响应外源6-BA,又与叶片中花青苷的积累密切相关,在花青苷的生物合成过程中起着重要的调控作用。 2018年01月15 00:00 2018年1期 49 56 3346555 董慧杰, 侯喜林, 韩克, 张志硕, 胡春梅 牛心甘蓝蜡粉缺失突变体410M特征的研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801007 <b>[目的]</b>本文旨在探索牛心甘蓝蜡粉缺失突变体410M的特征和实际应用价值,以丰富甘蓝种质资源,加速新品种创制和改良。<b>[方法]</b>调查牛心甘蓝野生型材料410W和蜡粉缺失突变体410M的农艺性状,测定其营养品质;扫描电镜观察其叶表超微结构;以蜡粉缺失突变体材料410M(P<sub>1</sub>)与其野生型410W(P<sub>2</sub>)为亲本分别配制6世代群体,分析410M蜡粉缺失性状的遗传规律;筛选出14个在拟南芥中参与蜡粉合成、转运的基因,并利用实时荧光定量PCR对其在410W和410M中的表达模式进行分析。<b>[结果]</b>蜡粉缺失甘蓝叶色亮绿,突变体410M球叶和外叶的维生素C含量显著高于野生型;其他表型及主要营养成分与野生型无明显差异。叶表超微结构观察显示,突变体叶表面光滑,蜡粉严重缺失;野生型叶表蜡粉分布致密,晶体结构主要为片状和线状。对6世代群体分离比例进行<i>χ</i><sup>2</sup>检测,结果表明410M蜡粉缺失性状为隐性单基因遗传。在参与拟南芥蜡粉生物合成、转运的14个基因中,共有7个基因在野生型中的表达显著高于突变体。<b>[结论]</b>蜡粉缺失突变体410M遗传稳定,商品性好,为育种和蜡粉分子基础研究的优良材料。 2018年01月15 00:00 2018年1期 57 63 1977098 石利朝<sup>1,2</sup>, 曾爱松<sup>2</sup>, 李家仪<sup>3</sup>, 王金香<sup>1,2</sup>, 宋立晓<sup>2</sup>, 严继勇<sup>2</sup> 黄瓜耐盐突变体材料的筛选与鉴定 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801008 <b>[目的]</b>本文旨在从黄瓜突变体材料中筛选耐盐突变体材料。<b>[方法]</b>对948份’长春密刺’黄瓜突变体材料进行NaCl溶液催芽试验,通过对比发芽率、发芽势和相对发芽率,结合胚根生长状况进行初步筛选,然后对发芽期筛选出的优质材料进行幼苗期盐胁迫处理(120 mmol·L<sup>-1</sup>NaCl营养液,处理7 d),测定株高、根长、茎粗、地上部鲜质量、地下部鲜质量、茎节数等形态指标,分析超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性以及叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素和可溶性蛋白含量等生理指标。<b>[结果]</b>根据发芽期突变体材料的发芽指标情况,共筛选出25份耐盐突变体材料,从中挑选出12份优质材料。在盐胁迫处理下12份黄瓜突变体各项形态及生理指标均出现下降,但耐盐性好的材料表现显著优于对照,最终经过综合比较后筛选出7份耐盐新材料:Mu-94-6、Mu-34-2、Mu-144-10、Mu-70-11、Mu-42-5、Mu-61-2、Mu-43-4。<b>[结论]</b>通过对突变体库的筛选,得到7份耐盐新材料。这些材料的获得对黄瓜耐盐性的遗传研究和新品种培育具有重要意义。 2018年01月15 00:00 2018年1期 64 70 986367 潘俏, 张舒玥, 沈迪, 吴家琪, 陈春莲, 陈洁, 陈劲枫, 娄群峰 通过定量蛋白组学研究OsGLO1对稻瘟病抗性的调控机制 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801009 <b>[目的]</b>水稻葡糖酸氧化酶1(OsGLO1)定位于水稻过氧化物酶体(peroxisome),参与过氧化氢的产生,但其是否参与水稻对稻瘟病抗性的调控还未见报道。本研究的目的是为了考察<i>OsGLO1</i>在水稻对稻瘟病抗性中的作用。<b>[方法]</b>以水稻‘日本晴’和稻瘟病病菌互作体系为研究对象,使用定量蛋白质组学技术,比较和分析了亲和型和非亲和型稻瘟病菌菌株侵染引起的水稻蛋白质表达变化。<b>[结果]</b>研究发现水稻OsGLO1蛋白的表达受到亲和型稻瘟病菌侵染的特异性抑制,但是在非亲和反应中的表达量变化则不明显。水稻原生质体过表达和沉默试验证明,<i>OsGLO1</i>的表达与水稻活性氧积累以及胼胝质沉积量呈正相关,且<i>OsGLO1</i>过表达诱发水杨酸(SA)和茉莉酸(JA)等多种防卫信号通路相关基因的表达。<b>[结论]</b><i>OsGLO1</i>可以激活水稻的早期防卫反应,并通过启动多种激素信号通路维持水稻对稻瘟病一定水平的抗性。考虑到其也参与植物对非生物胁迫抗性的调控,提示OsGLO1可能是水稻抵抗生物胁迫以及非生物胁迫中的重要因子。 2018年01月15 00:00 2018年1期 71 78 2437825 于东立, 宋晓欧, 鲍亚林, 林思远, 王建升, 王秀娟, 卢唯, 赵弘巍 基于环介导等温扩增技术快速检测瓜果腐霉菌 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801010 <b>[目的]</b>建立一种快速、准确的检测瓜果腐霉菌(<i>Pythium aphanidermatum</i>)的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,为诊断和防治瓜果腐霉菌引起的植物病害提供技术支撑。<b>[方法]</b>通过比较基因组学方法,在瓜果腐霉菌基因组上筛选有序列特异性的基因作为检测的靶标基因,设计LAMP特异性引物,建立一种基于颜色判定的快速、准确的LAMP检测方法,随后对该检测方法的特异性、灵敏度和发病组织实际检测等进行分析评价。<b>[结果]</b>鉴定到1个编码Trypsin蛋白酶的基因是瓜果腐霉菌特异的基因,以该序列作为靶标建立了LAMP检测方法。在扩增前加入染料羟基萘酚蓝(HNB)作为指示剂,在等温条件(64℃)下进行核酸扩增反应60 min,即可通过肉眼直接观察结果,HNB显示天蓝色即为阳性反应;同时,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳验证为梯形条带,也可判定为阳性反应。特异性试验中,建立的LAMP检测方法能将瓜果腐霉菌和其他病原菌区分开。灵敏度试验中,LAMP检测方法的最低检测限为100 pg·μL<sup>-1</sup>,与Real-time PCR反应灵敏度一样,是普通PCR反应灵敏度的100倍。发病组织实际检测试验中,该LAMP方法能检测出人工接种发病植株中的瓜果腐霉菌。<b>[结论]</b>成功建立了一种适用于基层使用的针对瓜果腐霉菌的快速检测技术,为该菌所致病害的准确诊断奠定了技术基础。 2018年01月15 00:00 2018年1期 79 87 4107734 李庆玲, 沈丹宇, 于佳, 赵媛媛, 朱也, 窦道龙 基于数字进化研究大灭绝对群落稳定性和协调停滞现象出现的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801011 <b>[目的]</b>协调停滞现象是间断平衡理论的延伸,它描述了多物种群落的长期稳定性,基于数字进化的研究对于更全面地解释该现象及其发生机制具有重要意思。<b>[方法]</b>以数字进化为研究手段并结合多种数据分析方法,探讨以互养关系为基础的可控环境中不同的大灭绝条件对协调停滞现象出现及群落各个水平稳定性的影响。<b>[结果]</b>1)在没有灭绝条件干扰的情况下,多数对照组群落结构长期保持稳定;2)大灭绝强度与群落在生态型-表型水平上的稳定性呈显著负相关关系;3)时间穿越入侵试验结果显示,群落成员在"表现"水平出现的停滞现象与群落在其他水平的较高稳定性不符,说明群落的生态稳定性并不能真实地反映停滞的出现;4)群落成员适合度的变化符合"红皇后"过程:任何物种或个体发生有利的进化改变必然会降低群落中其他物种或个体的适合度;5)试验中观察到的停滞现象均是非协调的。<b>[结论]</b>本研究阐明了不同程度和类型大灭绝事件对群落稳定性的影响,有助于增进对多物种群落进化特性的理解。 2018年01月15 00:00 2018年1期 88 97 4042738 罗天同, Gabriel YEDID 西瓜钾素吸收特征及钾肥施用优化机制 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801012 <b>[目的]</b>钾肥管理是西瓜生产的关键因素,对提高经济效益和维持生态环境可持续性具有重要意义,本文旨在研究西瓜的钾素吸收特征及钾肥优化施用的机制。<b>[方法]</b>采用田间试验方法,研究钾肥不同施用水平下西瓜各生育期的干物质量、钾素吸收量、钾素吸收速率以及西瓜的产量与品质。<b>[结果]</b>西瓜对钾素的吸收量与西瓜干物质量、产量和品质存在正相关关系。西瓜在不同生育期对钾肥水平的反应不同,幼苗期对钾肥最敏感,基肥施用量为90 kg·hm<sup>-2</sup> K<sub>2</sub>O时,西瓜根、茎、叶中的钾含量最高,施用量高于180 kg·hm<sup>-2</sup> K<sub>2</sub>O时,西瓜叶中的钾含量低于对照;在膨果期,钾肥追肥量为180 kg·hm<sup>-2</sup>时西瓜钾素吸收速率最大,该时期的钾素吸收量占全生育期吸收量的67.9%;在成熟期,450 kg·hm<sup>-2</sup> K<sub>2</sub>O水平下西瓜叶片中钾含量最高,600 kg·hm<sup>-2</sup> K<sub>2</sub>O水平下果实皮和瓤中的钾含量最高。钾肥施用量为300 kg·hm<sup>-2</sup>时,西瓜干物质积累量最大,钾素总吸收量最高,此时西瓜产量最高,且可溶性糖含量最高。<b>[结论]</b>西瓜钾肥施用的最佳方案为基肥施用90 kg·hm<sup>-2</sup>,坐果期追肥180 kg·hm<sup>-2</sup>,基肥和追肥的比例为1∶2。 2018年01月15 00:00 2018年1期 98 104 1321920 董亚<sup>1</sup>, 王硕<sup>1</sup>, 吴萍<sup>1</sup>, 陆海燕<sup>1</sup>, 周世品<sup>1,2</sup>, 董彩霞<sup>1</sup>, 任丽轩<sup>1,2</sup> 不同水肥模式下设施辣椒与土壤中氮和磷分布及其环境与经济效益 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801013 <b>[目的]</b>筛选最优施肥模式,为设施辣椒种植提供技术参考。<b>[方法]</b>以设施辣椒为研究对象,通过田间小区试验,研究了4种不同水肥模式(处理1:常规施肥;处理2:优化减除草剂;处理3:优化减农药;处理4:精准水肥一体化)土壤中以及辣椒果实和植株中氮、磷的分布,并探讨氮肥利用率及其环境与经济效益。<b>[结果]</b>氮、磷含量在不同深度土壤呈逐层递减的趋势。随着施肥次数的增加,氮、磷含量在不同深度土壤中不断积累,但向下淋溶效果皆不明显;辣椒生长过程中,处理4辣椒果实中氮、磷积累量增幅较其他3组处理高,后期与收获期辣椒果实中的总氮、总磷含量也显著高于其他3组处理,处理4能够有效提高辣椒果实对养分的吸收、利用和分配。处理4辣椒产量显著高于其他3组处理,较处理1、2和3分别增加79.37%、41.25%和16.49%;处理4的氮肥偏生产力显著高于其他3组处理,较处理1、2和3分别增加135.33%、85.33%和52.84%。处理4的产投比最高可达3.23,较处理1、2和3分别增加28.17%、31.30%和16.61%,可带来最佳的经济效益;处理1和2在辣椒生长前期温室气体排放通量相对较高,常规施肥模式下有可能带来温室效应的环境风险。<b>[结论]</b>精准水肥一体化处理的环境与经济效益最佳。 2018年01月15 00:00 2018年1期 105 112 1266530 李杏<sup>1</sup>, 李仁杰<sup>2</sup>, 汤婕<sup>1</sup>, 戴曹培<sup>1</sup>, 李学德<sup>1</sup> 植物多酚吸持-硫酸铁沉淀法去除水中氨氮的效果及影响因素研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801014 <b>[目的]</b>吸附法去除水中氨氮通常是采用固体吸附剂吸附后采用固液分离法去除。本文采用具有一定可溶性的天然高分子物质与水中氨氮结合,形成可溶的结合物,然后采用沉淀剂一步沉淀去除的新方法,探索其影响因素。<b>[方法]</b>以天然植物多酚类物质Y(以下简称"植物多酚Y")为吸持剂,以硫酸铁为沉淀剂,研究了模拟的氨氮废水的pH值、初始氨氮浓度、温度、植物多酚投加量和共存阳离子等因素对吸持沉淀法去除氨氮的影响。<b>[结果]</b>在含单一氨氮的模拟废水中植物多酚Y对氨氮吸持量在本试验条件下可高达到31.9 mg·g<sup>-1</sup>,模拟计算最大吸持量可达到46.5 mg·g<sup>-1</sup>。仅25 mg·L<sup>-1</sup>的共存阳离子K<sup>+</sup>、Na<sup>+</sup>、Mg<sup>2+</sup>、Ca<sup>2+</sup>的存在对植物多酚Y络合氨氮就有明显竞争作用,导致氨氮吸持量减少约15%~32%,当共存阳离子浓度提高到250 mg·L<sup>-1</sup>时,其中Ca<sup>2+</sup>可使植物多酚Y对氨氮吸持量降低54%。影响程度从大到小依次为Ca<sup>2+</sup>、Mg<sup>2+</sup>、K<sup>+</sup>、Na<sup>+</sup>。等质量浓度Ca<sup>2+</sup>的影响程度分别是Mg<sup>2+</sup>、K<sup>+</sup>、和Na<sup>+</sup>的1.4、1.7和2.1倍。Freundlich方程(<i>R</i><sup>2</sup>=0.983 4)能很好地描述氨氮在植物多酚上的络合行为;吉布斯自由能变化(Δ<i>G</i>)、焓变(Δ<i>H</i>)和熵变(Δ<i>S</i>)的计算结果表明:植物多酚对氨氮的络合是自发的放热过程。<b>[结论]</b>天然植物多酚物质对氨氮具有较大吸持量,形成分散均匀且稳定的胶体体系,易于被少量的金属盐脱稳而沉淀,这使其作为一种新方法用于含氨氮废水的快速处理成为可能,但共存阳离子对其吸持有明显抑制作用。 2018年01月15 00:00 2018年1期 113 119 1388207 余雅琳, 杨德坤, 高菲, 李琦, 孙露露, 梁剑茹, 周立祥 Chemerin调控牛肌内成熟脂肪细胞脂解的作用机制 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801015 <b>[目的]</b>本试验旨在分析脂肪自分泌因子Chemerin在牛肌内成熟脂肪细胞脂解中的作用及调控机制。<b>[方法]</b>体外培养牛肌内成熟脂肪细胞,采用油红O染色与抽提法检测成熟脂肪细胞脂解过程中脂肪含量变化,通过比色法测定细胞中甘油及游离脂肪酸的释放量;采用RT-qPCR及Western blot技术分析脂解关键基因<i>PPARα、LPL</i>与<i>HSL</i> mRNA及蛋白的表达情况。<b>[结果]</b>在牛肌内成熟脂肪细胞脂解过程中,细胞中Chemerin及其受体<i>CMKLR1</i> mRNA表达量显著降低(<i>P</i>&lt;0.05);Chemerin处理牛肌内成熟脂肪细胞后,细胞内脂肪含量减少,成熟脂肪细胞快速脂解为去分化的前体脂肪细胞,细胞中甘油和游离脂肪酸的释放量增加。脂解关键基因<i>PPARα、LPL</i>与<i>HSL</i> mRNA及蛋白表达水平与对照组相比极显著升高(<i>P</i>&lt;0.01)。<b>[结论]</b>Chemerin通过上调脂肪细胞脂解关键基因表达,促进了牛肌内成熟脂肪细胞中脂肪的分解,进而可降低肌内脂肪含量。 2018年01月15 00:00 2018年1期 120 125 1686580 付园园<sup>1</sup>, 陈坤琳<sup>1</sup>, 王振云<sup>1</sup>, 周光宏<sup>2</sup>, 李惠侠<sup>1</sup> 酶解青蒿对热应激肉鸡消化功能的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801016 <b>[目的]</b>本试验旨在研究热应激条件下日粮中添加酶解青蒿(EA)对肉鸡主要消化器官质量、养分表观利用率及小肠黏膜中二糖酶活性的影响。<b>[方法]</b>21日龄健康雄性爱拔益加肉鸡144只随机分成3组(每组6个重复,每个重复8只鸡):对照组(CON组),热应激组(HS组)饲喂基础日粮;酶解青蒿组(HS-EA组)饲喂添加1 000 mg·kg<sup>-1</sup> EA的基础日粮。CON组肉鸡饲养于22℃环境中,HS和HS-EA组肉鸡饲养在34℃环境中8 h(09:00—17:00),22℃环境中16 h(17:00—09:00)。试验期21 d。<b>[结果]</b>与CON组相比,热应激导致肉鸡饲料中粗脂肪(EE)、粗蛋白(CP)和有机物(OM)的养分表观利用率显著降低(<i>P</i>&lt;0.05),空肠和回肠中麦芽糖酶、蔗糖酶及回肠中乳糖酶活性显著降低(<i>P</i>&lt;0.05)。与HS组相比,日粮中添加1 000 mg·kg<sup>-1</sup> EA显著提高了肉鸡对饲料中EE、CP和OM的表观利用率(<i>P</i>&lt;0.05),提高了空肠、回肠中麦芽糖酶和蔗糖酶及回肠中乳糖酶活性(<i>P</i>&lt;0.05)。<b>[结论]</b>日粮中添加1 000 mg·kg<sup>-1</sup> EA可缓解热应激对肉鸡饲料养分表观利用率和肠黏膜中二糖酶活性造成的不良影响。 2018年01月15 00:00 2018年1期 126 131 944078 宋志华, 程康, 张婧菲, 王超, 钟翔, 张莉莉, 王恬 山羊睾丸支持细胞的培养与双荧光自噬报告载体的建立 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801017 <b>[目的]</b>本试验旨在建立一个实时追踪山羊细胞自噬发生状况的工具,以探讨细胞自噬对睾丸支持细胞(SC)和生殖细胞的影响。<b>[方法]</b>通过PCR法扩增<i>mCherry-EGFP-LC3</i>基因序列1 884 bp,将其导入真核表达载体pEX-3中,得到重组质粒p<i>mCherry-EGFP-LC3</i>;将p<i>mCherry-EGFP-LC3</i>及对照质粒pEX-3分别转染体外分离培养的山羊SC,饥饿处理12 h后用荧光显微镜观察融合蛋白在细胞中的表达,用RT-qPCR和Western blot检测细胞中自噬相关基因和蛋白表达变化,用透射电镜观察细胞自噬体的形成。<b>[结果]</b>成功构建了双荧光自噬报告载体,该载体能在山羊SC中表达,荧光显微镜下可见绿色荧光和红色荧光表达;饥饿处理后,该载体可以指示细胞中自噬泡的形成过程,且细胞自噬相关标记<i>Beclin1</i> mRNA以及<i>LC3 Ⅱ/LC3Ⅰ</i> mRNA比值和蛋白水平均显著上调,并能观察到初始自噬体的形成。<b>[结论]</b>获得的山羊SC可以作为后续试验的细胞模型;构建的双荧光p<i>mCherry-EGFP-LC3</i>自噬报告载体可为进一步研究山羊SC的自噬发生提供有效的工具。 2018年01月15 00:00 2018年1期 132 139 2898956 韩乐<sup>1</sup>, 张国敏<sup>2</sup>, 杨花<sup>1</sup>, 庞静<sup>1</sup>, 万永杰<sup>1</sup>, 姚晓磊<sup>1</sup>, 王锋<sup>1</sup>, 张艳丽<sup>1</sup> 鹅<i>VNN1</i>基因的克隆及组织表达分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801018 <b>[目的]</b>Vanin是一种泛酰巯基乙胺酶,在脂类代谢中发挥重要作用。本试验目的是扩增鹅<i>Vanin</i>基因亚型(<i>VNN1</i>)基因的cDNA序列,检测<i>VNN1</i>基因在鹅不同组织中mRNA水平的表达规律。<b>[方法]</b>以太湖鹅(<i>Anser anser</i>)肝脏总RNA为模板,采用RT-PCR和快速扩增cDNA末端(RACE)方法克隆鹅<i>VNN1</i>基因全长cDNA序列,并运用多种生物信息学软件对其进行分析,应用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测<i>VNN1</i>基因在不同组织的表达情况。<b>[结果]</b>序列分析表明:鹅<i>VNN1</i>基因(GenBank登录号:KY399733)cDNA全长1 924 bp,包含1 476 bp的开放阅读框,35 bp的5’UTR和417 bp的3’UTR,共编码491个氨基酸。经预测鹅<i>VNN1</i>基因编码的蛋白质由7 646个原子组成,相对分子质量为54 870.61,理论等电点为5.23,是不稳定蛋白。在线预测发现鹅与鸭的VNN1蛋白三级结构呈现高度相似的螺旋和折叠。序列分析表明,鹅与绿头鸭的<i>VNN1</i>基因核苷酸及氨基酸同源性较高。系统进化树分析表明,鹅与绿头鸭亲缘关系较近。qPCR结果表明,鹅<i>VNN1</i>基因在肝脏的表达量显著高于小肠、肾、脾和肺(<i>P</i>&lt;0.01)。<b>[结论]</b>获得鹅<i>VNN1</i>基因的全长cDNA序列,该基因在肝脏中高表达。 2018年01月15 00:00 2018年1期 140 146 2695150 李洁<sup>1,2</sup>, 周浩<sup>2</sup>, 郁建锋<sup>2</sup>, 姚文<sup>1</sup>, 顾志良<sup>2</sup> GEM技术浓缩纯化O型口蹄疫病毒灭活抗原方法的建立 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801019 <b>[目的]</b>验证利用革兰氏阳性增强基质颗粒(GEM)浓缩纯化口蹄疫病毒(FMDV)抗原的可行性。<b>[方法]</b>将含有3个自溶素基序的锚钩蛋白基因(<i>PA</i>)与针对O型口蹄疫病毒特异性纳米抗体基因(<i>VHH</i>)串联克隆入原核表达载体pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-<i>VPA</i>,将其转化大肠杆菌宿主菌BL21(DE3),表达获得融合重组蛋白VPA。先将GEM颗粒与重组蛋白VPA在37℃孵育30 min,离心,取沉淀用适量的FMDV抗原液重悬,再经一步低速离心,获得沉淀即为浓缩纯化的口蹄疫病毒抗原。利用SDS-PAGE、Western-blot、蛋白含量测定及146S测定等方法对浓缩纯化方法的可行性进行鉴定,并通过动物免疫试验初步验证浓缩纯化后抗原的免疫原性。<b>[结果]</b>VPA融合蛋白能够在大肠杆菌中部分可溶性表达。作为接头蛋白,VPA既能与GEM颗粒结合,又能与FMDV抗原结合。SDS-PAGE与Western-blot结果表明:FMDV通过GEM法得到有效纯化;146S测定结果表明FMDV的回收效率达到99%;总蛋白含量测定结果显示口蹄疫抗原杂蛋白去除率达到90%;动物免疫试验结果显示GEM技术纯化后的FMDV具有良好的免疫原性。<b>[结论]</b>利用GEM技术浓缩纯化口蹄疫病毒抗原是可行的。 2018年01月15 00:00 2018年1期 147 153 1884072 汪浩<sup>1,2</sup>, 乔绪稳<sup>1,3</sup>, 陈瑾<sup>1,3</sup>, 李图帅<sup>1,3</sup>, 张元鹏<sup>1,3</sup>, 侯继波<sup>1,3</sup>, 郑其升<sup>1,3</sup>, 孙卫东<sup>2</sup> 发酵饲料对鲤鱼幼鱼生长性能、消化酶活性、肌肉品质和免疫机能的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801020 <b>[目的]</b>本试验旨在探究发酵饲料对鲤鱼幼鱼生长性能、体组成、肠道消化酶活性、肌肉品质和免疫机能的影响。<b>[方法]</b>制备了5组饲料:基础饲料(G1)、基础饲料中添加2.5%(G2)或5%(G3)发酵饲料、基础饲料中菜粕用5%(G4)或10%(G5)的发酵饲料等蛋白替代。300尾鲤鱼随机分5组,每组4个重复,每重复15尾,每组饲喂1种饲料。每日将鱼饱食投喂3次,投喂10周。养殖结束后采集血液、肝脏、肠道、肌肉样品测定免疫机能、消化酶活性和肌肉品质指标。<b>[结果]</b>G3、G4、G5组的饲料系数显著低于G1组(<i>P</i>&lt;0.05),但与G2组差异不显著(<i>P</i>&gt;0.05)。各组间增重率、特定生长率、摄食量、蛋白质效率以及氮/能量保留率等指标差异均不显著(<i>P</i>&gt;0.05)。发酵饲料对肌肉水分、蛋白质、脂肪、灰分和能量水平、系水力、蒸煮损失、含肉率、肌肉质构以及肉色(<i>a</i><sup>*</sup>、<i>b</i><sup>*</sup>与<i>L</i><sup>*</sup>值)等指标均无显著差异(<i>P</i>&gt;0.05)。G1组肠道脂肪酶活性显著低于G3、G4和G5组(<i>P</i>&lt;0.05),而其淀粉酶活性显著高于G3与G5组(<i>P</i>&lt;0.05)。G1组血浆皮质醇与补体C3含量显著低于G4组(<i>P</i>&lt;0.05),但其髓质过氧化物酶活性显著高于G4组(<i>P</i>&lt;0.05)。此外,各组间肝脏过氧化氢酶活性、总抗氧化能力、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性与谷胱甘肽过氧化物酶活性均无显著差异。<b>[结论]</b>发酵饲料不仅可以提高鲤鱼幼鱼的饲料利用率,还可以提高其消化功能和非特异性免疫机能,并且不会对肌肉品质造成不良影响。 2018年01月15 00:00 2018年1期 154 162 1020572 钟小群<sup>1</sup>, 李向飞<sup>1</sup>, 蔡万存<sup>1</sup>, 徐超<sup>1</sup>, 李其松<sup>2</sup>, 黄健<sup>2</sup>, 刘文斌<sup>1</sup> 传统与现代工艺金华火腿蛋白质的体外消化特性研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801021 <b>[目的]</b>比较传统与现代2种加工工艺条件下金华火腿蛋白质的消化特性。<b>[方法]</b>以传统工艺和现代工艺的金华火腿为材料,通过体外模拟胃肠道消化反应,样品经过匀浆、胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,测定蛋白质消化率和匀浆物粒径,并进行SDS-PAGE分析,运用LC-MS/MS分析消化产物。<b>[结果]</b>经胃蛋白酶和/或胰蛋白酶消化后,现代工艺火腿的消化率显著高于传统工艺(<i>P</i>&lt;0.05)。酶解消化前后,现代工艺火腿的粒径值要显著小于传统工艺。SDS-PAGE凝胶条带分析结果显示:未经消化的样品条带中,传统工艺火腿的大部分蛋白条带光密度显著高于现代工艺,而经过胃蛋白酶消化后,大部分高分子质量条带消失,只有小分子质量条带在凝胶底部被采集。LC-MS/MS分析表明:传统工艺火腿蛋白质酶解产物含有的相对分子质量为1 500~2 500的肽段多于现代工艺,并且2种工艺下的火腿蛋白酶解产物大多来自于肌原纤维蛋白,尤其是肌球蛋白。<b>[结论]</b>现代工艺火腿的蛋白质消化特性优于传统工艺。 2018年01月15 00:00 2018年1期 163 171 1904000 李莹<sup>1,2</sup>, 刘源<sup>3</sup>, 张丹妮<sup>3</sup>, 周光宏<sup>1</sup>, 徐幸莲<sup>1</sup>, 李春保<sup>1</sup>, 郑福平<sup>2</sup> 拆装型黄麻纤维后墙温室墙体传热特性研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801022 <b>[目的]</b>为实现日光温室的全年型生产,设计了拆装式黄麻纤维后墙温室,以探讨黄麻纤维材料作为温室拆装墙体的可行性。<b>[方法]</b>以拆装式黄麻纤维后墙温室为试验温室,以当地传统黏土砖后墙日光温室为对照,对温室墙体的热工性能、传热特性以及室内热环境进行了试验研究。<b>[结果]</b>冬季温室内部气温保持在4℃以上,黄麻墙结构保温效果良好;夏季黄麻墙拆除后,室内最高气温在40℃以下。温室墙体内、外表面温度受太阳辐射及室内、外气温的共同影响,呈现与气温相同的日变化规律。室内气温、墙面温度影响墙内各深度层次的温度分布,温度的总体变化趋势是由内表面向外表面沿厚度方向递减。与砖墙相比,黄麻墙蓄热性能较低,但保温隔热效果较好,能量利用率较高。<b>[结论]</b>黄麻纤维材料保温隔热性能较好,质量轻便于安装与拆卸且建造与维护成本较低,因此可作为一种新型温室墙体材料。 2018年01月15 00:00 2018年1期 172 180 3286234 何向丽<sup>1</sup>, 王健<sup>1</sup>, 郭世荣<sup>1</sup>, 孙锦<sup>1,2</sup>, 张剑<sup>1</sup>, 倪梦伟<sup>1</sup>, 蓝盾<sup>1</sup> 冬季温室土壤中不同方式添加水稻秸秆的腐解及其土温效应研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801023 <b>[目的]</b>分析冬季温室土壤不同方式添加水稻秸秆的土壤温度变化及秸秆腐解率的变化,为探讨水稻秸秆移位用于冬季温室土壤增温提供参考。<b>[方法]</b>考虑秸秆用量、秸秆粉碎、添加养分和添加腐熟菌剂等4个因素,设计了7个秸秆还田方式处理,以不添加秸秆为对照,采用多点温度测量装置测定土壤温度,通过测定秸秆失重率及残余秸秆灰分含量等表征秸秆腐解率。<b>[结果]</b>水稻秸秆辅以牛粪或腐熟菌剂在冬季温室沟埋腐解,可显著提升冬季温室土壤表层土温,有效缩小土壤温差:在冬季气温最低时,水稻秸秆辅以牛粪处理比对照提升土温0.8℃,辅以腐熟菌剂处理比对照提升土温1.1℃;在90 d的试验期间,所有秸秆处理土壤温差平均降低0.7℃,而水稻秸秆辅以牛粪处理土壤温差降低2.0℃,秸秆量为2%的处理土壤温差平均降低2.9℃,但秸秆量为1%且辅以腐熟菌剂处理土壤温差平均降低3.1℃。秸秆在温室内集沟还田并辅以适宜的辅助剂还可提高水稻秸秆的腐解率:试验期结束后,未添加辅助剂的秸秆处理组的秸秆失重率为55.96%,辅以腐熟菌剂处理组的秸秆失重率提高到58.33%;辅以牛粪的处理中,腐解产物的残余灰分含量比对照提高12.6%,辅以腐熟菌剂的处理比对照提高26.0%。<b>[结论]</b>水稻秸秆配施菌剂集沟添加于冬季温室能促进秸秆腐解,提升土温,降低温差,是为温室植物生长提供稳定温度环境的有效方式。 2018年01月15 00:00 2018年1期 181 189 3084386 朱奇, 陈青春, 刘玉涛 大豆叶柄离体再生体系研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=201801024 <b>[目的]</b>建立大豆叶柄外植体的离体再生体系,为大豆遗传转化体系的改进和提高提供技术基础。<b>[方法]</b>以大豆品种‘K06-82’无菌苗叶柄为外植体,比较不同种类的植物生长调节剂及其组合对叶柄愈伤组织诱导、不定芽分化、不定芽伸长及生根等过程的影响,建立大豆叶柄离体再生体系。<b>[结果]</b>大豆品种‘K06-82’的叶柄愈伤组织形成的适宜培养基为改良MS+2.0 mg·L<sup>-1</sup>α-萘乙酸(NAA),愈伤组织形成率为74.21%,愈伤组织密度为0.72 g·cm<sup>-3</sup>;不定芽分化的适宜培养基为改良MS+2.0 mg·L<sup>-1</sup>6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.2 mg·L<sup>-1</sup> NAA,分化率为49.82%,平均不定芽数2.98个;不定芽伸长的适宜培养基为改良MS+1.0 mg·L<sup>-1</sup>赤霉素(GA<sub>3</sub>),伸长比率为35.62%,平均芽长为2.01 cm;不定根诱导的最适培养基为1/2改良MS+0.8 mg·L<sup>-1</sup>吲哚丁酸(IBA),生根率和生根苗的移栽存活率分别达到88.32%和97.80%。<b>[结论]</b>初步建立了大豆叶柄外植体的离体再生体系。 2018年01月15 00:00 2018年1期 190 194 1595186 郭阳鑫<sup>1,2,3</sup>, 卫志明<sup>2</sup>, 佘跃辉<sup>1</sup>, 朱木兰<sup>2,3</sup>